الانتقال إلى المحتوى
خلايا A431
الأنسجة
البشرة
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
A-431, A431/P

المستندات

خلايا A431

Cell line · رقم المنتج 300112

يُعد خط الخلايا A431، المستمد من ورم سرطاني بشري صلب من النوع الظهاري لدى مريضة تبلغ من العمر 85 عامًا، خط خلايا ورمية بشرية ذات شكل ظهاري...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي A431، المشتق من ورم سرطاني بشري صلب في مريضة تبلغ من العمر 85 عاماً، هو خط خلوي ورمي بشري ذو مورفولوجيا طلائية ينمو عادةً في مجموعات. يُستخدم خط الخلية A-431 على نطاق واسع في دراسات السرطان والسمية والأورام المناعية، حيث يُستخدم كعنصر تحكم إيجابي لتعبير مستقبلات عامل نمو البشرة (EGF) بسبب كثافة مستقبلاته العالية.

عند ارتباط عامل نمو البشرة (EGF) بمستقبله (EGFR) على سطح خلايا A431، تحدث فسفرة التيروزين السريعة للبروتينات الغشائية، مما يؤدي إلى سلسلة من مسارات الإشارات داخل الخلايا. تشمل هذه المسارات مساري MAPK/ERK وPI3K/AKT، وهما مساران محوريان في تنظيم تطور دورة الخلية وبقائها وتكاثرها.

يحفّز EGFR تكاثر الخلايا بتركيزات منخفضة، بينما يثبط النمو بتركيزات أعلى ويحفز التمايز النهائي في خلايا A431. تؤكد هذه الاستجابة الديناميكية لمحفز النمو EGFR على فائدة خط الخلية في استكشاف مسارات إشارات الخلية ودورة الخلية في سياق السرطان.

تُستخدم نماذج الطعم الغريب المشتقة من خلايا A-431 لدراسة سلوك الورم في بيئة حية وتقييم العلاجات المضادة للسرطان. وتساعد هذه النماذج في تقييم كيفية تأثير العلاجات مثل مكملات عامل النمو EGF والإشعاع على نمو الورم وتسليط الضوء على حساسية الخلايا للإشعاع.

باختصار، يعمل خط الخلية A-431 كنموذج خلية سرطان البشرة البشري الذي لا يقدر بثمن، مما يسهل فهمًا أعمق لإشارات عامل النمو البشري EGFR وبيولوجيا الورم وتطوير التدخلات العلاجية التي تهدف إلى مكافحة سرطان البشرة وغيره من أنواع السرطان ذات الصلة.

الأنسجة
البشرة
المرض
سرطان الخلايا الحرشفية
المرادفات
  • A-431
  • A431/P

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
مضلع مسطح متعدد الأضلاع يشبه الظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران المثبطة للمناعة
النمط الكروموسومي
ستة كروموسومات مؤشِّرة مع إعادة ترتيب الكروموسومات: der(6)، و der(7)، و der(17)، و der(21)، و dic(13،14)، و dic(14،18). تضخيم الجين السرطاني C-MYC في 8q24 في كروموسومين مؤشِّرين: د(8)(q24) ودير(15) t(8،15)(q22،p11).

04المعرّفات

المرجع
A431 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 300112)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0037

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
مواقع الارتباط بعامل النمو السحري EGF
التعبير البروتيني
P53 إيجابي
الإيزوزيمات
G6PD، ب، PGM1، 1، PGM3، 1، ES-D، 1، Me-2، 0، AK-1، 1، GLO-1، 2
الأنماط الطفريّة
BRAF V600Ewt
المنتجات
HBp17

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 4 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
85 سنة