Премини към съдържанието
Клетки A431
Тъкан
Епидермоиден
Заболяване
Плоскоклетъчен карцином
Синоними
A-431, A431/P

Документи

Клетки A431

Cell line · Номер на продукта 300112

Клетъчната линия A431, получена от тумор на солиден епидермоиден карцином при 85-годишна пациентка, е човешка туморна клетъчна линия с епителиална морфология...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия A431, получена от солиден епидермоиден карцином на 85-годишна пациентка, е човешка туморна клетъчна линия с епителна морфология, която обикновено расте на групи. Клетъчната линия А-431 се използва широко в проучванията на рака, токсичността и имуноонкологията, като служи като положителна контрола за експресията на рецептора на епидермалния растежен фактор (EGF) поради високата си рецепторна плътност.

При свързването на EGF с неговия рецептор (EGFR) на повърхността на клетките А-431 се извършва бързо тирозинфосфорилиране на мембранни протеини, което задейства каскада от вътреклетъчни сигнални пътища. Тези пътища включват MAPK/ERK и PI3K/AKT пътищата, които са ключови за регулирането на прогресията на клетъчния цикъл, оцеляването и пролиферацията.

EGFR стимулира клетъчната пролиферация при ниски концентрации, докато при по-високи концентрации инхибира растежа и предизвиква терминална диференциация в клетките A431. Този динамичен отговор към EGFR подчертава полезността на клетъчната линия за изследване на сигналните пътища и клетъчния цикъл в контекста на рака.

Моделите на ксенографт, получени от клетките на А-431, се използват за изучаване на поведението на туморите в жива среда и за оценка на противоракови терапии. Тези модели помагат да се оцени как леченията, като например добавяне на EGF и облъчване, влияят на туморния растеж и подчертават чувствителността на клетките към облъчване.

В обобщение, клетъчната линия A-431 служи като безценен клетъчен модел на човешки епидермоиден карцином, като улеснява по-задълбоченото разбиране на сигнализацията на EGFR, туморната биология и разработването на терапевтични интервенции, насочени към борбата с епидермоидния карцином и други свързани с него видове рак.

Тъкан
Епидермоиден
Заболяване
Плоскоклетъчен карцином
Синоними
  • A-431
  • A431/P

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиални, плоски многоъгълни
Туморогенен
Да, при имуносупресирани мишки
Кариотип
Шест маркерни хромозоми с пренареждания: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) и dic(14,18). Амплификация на C-MYC онкоген в 8q24 в две маркерни хромозоми: dup(8)(q24) и der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Идентификатори

Източник
A431 (каталожен номер 300112 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0037

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Свързващи места на EGF
Експресия на протеини
P53 положителен
Изоензими
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Мутационен профил
BRAF V600Ewt
Продукти
HBp17

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2 ще доведе до конфлуентен монослой в рамките на 4 дни.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
85 години