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A431 細胞
Cell line · Product number 300112
The A431 cell line, derived from a solid epidermoid carcinoma tumor in an 85-year-old female patient, is a human tumor cell line with an epithelial morpho...
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01General information
- Description
A431 細胞系源自一名 85 歲女性患者的實體鱗狀細胞癌腫瘤，是一種具有上皮形態的人類腫瘤細胞系，通常呈簇狀生長。 A-431 細胞系廣泛應用於癌症、毒性及免疫腫瘤學研究中，並因其受體密度高，而用作表皮生長因子（EGF）受體表達的陽性對照。
當 EGF 與 A431 細胞表面的受體（EGFR）結合時，膜蛋白會發生快速的酪胺酸磷酸化，從而觸發一系列細胞內訊號傳導途徑。 這些路徑包括 MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 路徑，它們在調節細胞週期進程、存活和增殖方面起著關鍵作用。
EGFR 在低濃度下會刺激細胞增殖，而在高濃度下則會抑制 A431 細胞的生長並誘導其終末分化。這種對 EGFR 的動態反應，凸顯了該細胞系在探索癌症背景下細胞訊號傳導路徑及細胞週期方面的實用價值。
源自 A-431 細胞的異種移植模型，用於在活體環境中研究腫瘤行為並評估抗癌療法。這些模型有助於評估諸如 EGF 補充和放射治療等療法如何影響腫瘤生長，並凸顯細胞對放射線的敏感性。
總而言之，A-431 細胞系作為極具價值的人類鱗狀細胞癌細胞模型，有助於更深入地理解 EGFR 訊號傳導、腫瘤生物學，並促進針對鱗狀細胞癌及其他相關癌症的治療干預措施之開發。
- Tissue
- 鱗狀細胞癌
- Disease
- 鱗狀細胞癌
- Synonyms
- A-431
- A431/P
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣、扁平多邊形
- Tumourigenic
- 是的，在免疫抑制小鼠身上
- Karyotype
- 六條具有重排的標記染色體：der(6)、der(7)、der(17)、der(21)、dic(13,14) 及 dic(14,18)。 兩條標記染色體上 8q24 位點的 C-MYC 致癌基因擴增：dup(8)(q24) 及 der(15)t(8,15)(q22,p11)。
04Identifiers
- Citation
- A431（Cytion 型號 300112）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0037
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- EGF 結合位點
- Protein expression
- P53 陽性
- Isoenzymes
- G6PD、B、PGM1、1、PGM3、1、ES-D、1、Me-2、0、AK-1、1、GLO-1、2
- Mutational profile
- BRAF V600Ewt
- Products
- HBp17
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM，含 4.5 g/L 葡萄糖、4 mM L-谷氨醯胺、3.7 g/L NaHCO₃ 及 1.0 mM 丙酮酸鈉（Cytion 產品編號 820300a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 個細胞/cm² 將在 4 天內形成密合的單層細胞。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 85年
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes