Skip to content
เซลล์ A431
Tissue
เอพิเดอร์โมอิด
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
A-431, A431/P

Documents

เซลล์ A431

Cell line · Product number 300112

The A431 cell line, derived from a solid epidermoid carcinoma tumor in an 85-year-old female patient, is a human tumor cell line with an epithelial morpho...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ A431 ซึ่งได้มาจากเนื้องอกชนิด carcinoma epidermoid ที่เป็นก้อนในผู้ป่วยหญิงอายุ 85 ปี เป็นเซลล์ไลน์มะเร็งของมนุษย์ที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาเป็นเยื่อบุผิว โดยทั่วไปจะเจริญเติบโตเป็นกลุ่ม เซลล์ไลน์ A-431 ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการศึกษาด้านมะเร็ง ความเป็นพิษ และภูมิคุ้มกันเนื้องอก โดยใช้เป็นเซลล์ควบคุมเชิงบวกสำหรับการแสดงออกของตัวรับ epidermal growth factor (EGF) เนื่องจากมีความหนาแน่นของตัวรับสูง

เมื่อ EGF จับกับตัวรับ (EGFR) บนผิวเซลล์ A431 จะเกิดการฟอสโฟรีเลชันของไทโรซีนอย่างรวดเร็วในโปรตีนเยื่อหุ้มเซลล์ ซึ่งกระตุ้นให้เกิดกระบวนการส่งสัญญาณภายในเซลล์แบบลูกโซ่ กระบวนการเหล่านี้ประกอบด้วยเส้นทาง MAPK/ERK และ PI3K/AKT ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการควบคุมการดำเนินของวัฏจักรเซลล์ การอยู่รอด และการเพิ่มจำนวนของเซลล์

EGFR กระตุ้นการเพิ่มจำนวนเซลล์ที่ความเข้มข้นต่ำ แต่ที่ความเข้มข้นสูงขึ้น จะยับยั้งการเจริญเติบโตและกระตุ้นการแยกตัวเป็นเซลล์เฉพาะทางในเซลล์ A431 การตอบสนองแบบไดนามิกต่อ EGFR นี้เน้นย้ำถึงประโยชน์ของสายพันธุ์เซลล์นี้ในการสำรวจเส้นทางการส่งสัญญาณของเซลล์และวัฏจักรเซลล์ในบริบทของมะเร็ง

แบบจำลองเซลล์-เอ็กโซกราฟต์ที่ได้จากเซลล์ A-431 ใช้สำหรับการศึกษาพฤติกรรมของเนื้องอกในสภาพแวดล้อมที่มีชีวิต และประเมินการรักษาโรคมะเร็ง แบบจำลองเหล่านี้ช่วยประเมินว่าการรักษาเช่นการเสริม EGF และการฉายรังสี มีผลต่อการเจริญเติบโตของเนื้องอกอย่างไร และเน้นย้ำถึงความไวของเซลล์ต่อรังสี

โดยสรุป สายเซลล์ A-431 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองเซลล์มะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิดของมนุษย์ที่มีคุณค่าอย่างยิ่ง ช่วยให้เกิดความเข้าใจที่ลึกซึ้งยิ่งขึ้นเกี่ยวกับการส่งสัญญาณของ EGFR ชีววิทยาของเนื้องอก และการพัฒนาวิธีการรักษาที่มุ่งเน้นการต่อสู้กับมะเร็งผิวหนังชนิดเอพิเดอร์โมอิดและมะเร็งชนิดอื่นๆ ที่เกี่ยวข้อง

Tissue
เอพิเดอร์โมอิด
Disease
มะเร็งผิวหนังชนิดเซลล์สความัส
Synonyms
  • A-431
  • A431/P

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายเยื่อบุผิว, แบน, มีรูปหลายเหลี่ยม
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง
Karyotype
โครโมโซมเครื่องหมายหกตัวที่มีการจัดเรียงใหม่: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14), และ dic(14,18)การขยายตัวของยีนก่อมะเร็ง C-MYC ที่ตำแหน่ง 8q24 ในโครโมโซมเครื่องหมายสองชนิด: dup(8)(q24) และ der(15)t(8,15)(q22,p11)

04Identifiers

Citation
A431 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300112)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
ตำแหน่งที่จับกับ EGF
Protein expression
P53 เป็นบวก
Isoenzymes
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutational profile
BRAF V600Ewt
Products
HBp17

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 4 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
85 ปี