Células A431
Cell line · Product number 300112
The A431 cell line, derived from a solid epidermoid carcinoma tumor in an 85-year-old female patient, is a human tumor cell line with an epithelial morpho...
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01General information
- Description
A linhagem celular A431, derivada de um tumor de carcinoma epidermoide sólido em uma paciente de 85 anos, é uma linhagem celular tumoral humana com morfologia epitelial, que normalmente cresce em aglomerados. A linhagem celular A-431 é amplamente utilizada em estudos sobre câncer, toxicidade e imuno-oncologia, servindo como controle positivo para a expressão do receptor do fator de crescimento epidérmico (EGF) devido à sua alta densidade de receptores.
Após a ligação do EGF ao seu receptor (EGFR) na superfície das células A431, ocorre uma rápida fosforilação da tirosina nas proteínas de membrana, desencadeando uma cascata de vias de sinalização intracelulares. Essas vias incluem as vias MAPK/ERK e PI3K/AKT, que são fundamentais na regulação da progressão do ciclo celular, da sobrevivência e da proliferação.
O EGFR estimula a proliferação celular em baixas concentrações, enquanto que, em concentrações mais elevadas, inibe o crescimento e induz a diferenciação terminal nas células A431. Essa resposta dinâmica ao EGFR ressalta a utilidade da linhagem celular na exploração das vias de sinalização celular e do ciclo celular no contexto do câncer.
Modelos de xenoenxertos derivados de células A-431 são utilizados para estudar o comportamento tumoral em um ambiente vivo e avaliar terapias anticâncer. Esses modelos ajudam a avaliar como tratamentos, tais como a suplementação com EGF e a radiação, afetam o crescimento tumoral e destacam a sensibilidade das células à radiação.
Em resumo, a linhagem celular A-431 serve como um modelo celular inestimável do carcinoma epidermoide humano, facilitando uma compreensão mais profunda da sinalização do EGFR, da biologia tumoral e do desenvolvimento de intervenções terapêuticas voltadas para o combate ao carcinoma epidermoide e a outros tipos de câncer relacionados.
- Tissue
- Epidermoide
- Disease
- Carcinoma de células escamosas
- Synonyms
- A-431
- A431/P
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial, plano e poligonal
- Tumourigenic
- Sim, em camundongos imunossuprimidos
- Karyotype
- Seis cromossomos marcadores com rearranjos: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) e dic(14,18). Amplificação do oncogene C-MYC em 8q24 em dois cromossomos marcadores: dup(8)(q24) e der(15)t(8,15)(q22,p11).
04Identifiers
- Citation
- A431 (número de catálogo da Cytion 300112)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0037
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Sites de ligação do EGF
- Protein expression
- P53 positivo
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
- Mutational profile
- BRAF V600Ewt
- Products
- HBp17
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, p/v: 4,5 g/L de glicose, p/v: 4 mM de L-glutamina, p/v: 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo da Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1 x 104 células/cm² resultará em uma monocamada confluente em 4 dias.
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Post-thaw recovery
- Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 85 anos
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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