Pereiti prie turinio
A431 ląstelės
Audinys
Epidermoidinis
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
A-431, A431/P

Dokumentai

A431 ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300112

A431 ląstelių linija, išskirta iš 85 metų moters kietosios epidermoidinės karcinomos naviko, yra žmogaus naviko ląstelių linija, pasižyminti epiteline morfologija...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

A431 ląstelių linija, gauta iš 85 metų amžiaus pacientės epidermoidinės karcinomos naviko, yra epitelinės morfologijos žmogaus naviko ląstelių linija, paprastai auganti grupėmis. A-431 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio, toksiškumo ir imunoonkologiniuose tyrimuose, nes dėl didelio receptorių tankio yra teigiama epidermio augimo faktoriaus (EGF) receptorių raiškos kontrolė.

EGF prisijungus prie jo receptoriaus (EGFR), esančio A431 ląstelių paviršiuje, vyksta greitas membranos baltymų tirozino fosforilinimas, sukeliantis viduląstelinių signalinių kelių kaskadą. Šie keliai apima MAPK/ERK ir PI3K/AKT kelius, kurie yra svarbiausi reguliuojant ląstelių ciklo progresavimą, išgyvenamumą ir proliferaciją.

EGFR stimuliuoja ląstelių proliferaciją esant mažoms koncentracijoms, o esant didesnėms koncentracijoms slopina augimą ir sukelia galutinę A431 ląstelių diferenciaciją. Šis dinamiškas atsakas į EGFR pabrėžia ląstelių linijos naudingumą tiriant ląstelių signalų kelius ir ląstelių ciklą vėžio kontekste.

A-431 ląstelių ksenograftų modeliai naudojami tiriant naviko elgseną gyvoje aplinkoje ir vertinant priešvėžinius gydymo būdus. Šie modeliai padeda įvertinti, kaip gydymas, pavyzdžiui, EGF papildymas ir spinduliavimas, veikia naviko augimą, ir išryškina ląstelių jautrumą spinduliavimui.

Apibendrinant galima teigti, kad A-431 ląstelių linija yra neįkainojamas žmogaus epidermoidinės karcinomos ląstelių modelis, padedantis geriau suprasti EGFR signalizaciją, naviko biologiją ir kurti terapines intervencijas, skirtas kovai su epidermoidine karcinoma ir kitais susijusiais vėžiniais susirgimais.

Audinys
Epidermoidinis
Liga
Plokščialąstelinė karcinoma
Sinonimai
  • A-431
  • A431/P

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelinės, plokščios daugiakampės formos
Tumorogeninis
Taip, su imunosupresinėmis pelėmis
Kariotipas
Šešios žymėtosios chromosomos su persitvarkymais: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) ir dic(14,18). C-MYC onkogeno amplifikacija ties 8q24 dviem žymėjimo chromosomomis: dup(8)(q24) ir der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identifikatoriai

Nuoroda
A431 (Cytion katalogo numeris 300112)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Išraiška ir jautrumas

Išreikšti receptoriai
EGF surišimo vietos
Baltojų baltymų ekspresija
P53 teigiamas
Izofermentai
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutacijų profilis
BRAF V600Ewt
Produktai
HBp17

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2 per 4 dienas suformuos konfluentinį monosluoksnį.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
85 metai