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Células A431
Pañuelo de papel
Epidermoide
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
A-431, A431/P

Documentos

Células A431

Cell line · Número de producto 300112

La línea celular A431, derivada de un carcinoma epidermoide sólido en una paciente de 85 años, es una línea celular tumoral humana con una morfología epitelial...

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01Información general

Descripción

La línea celular A431, derivada de un tumor sólido de carcinoma epidermoide de una paciente de 85 años de edad, es una línea celular tumoral humana de morfología epitelial que suele crecer en grupos. La línea celular A-431 se utiliza ampliamente en estudios sobre cáncer, toxicidad e inmuno-oncología, y sirve como control positivo de la expresión del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGF) debido a su alta densidad de receptores.

Tras la unión del EGF a su receptor (EGFR) en la superficie de las células A431, se produce una rápida fosforilación en tirosina de las proteínas de membrana, desencadenando una cascada de vías de señalización intracelular. Estas vías incluyen las vías MAPK/ERK y PI3K/AKT, que son fundamentales para regular la progresión del ciclo celular, la supervivencia y la proliferación.

El EGFR estimula la proliferación celular a bajas concentraciones, mientras que a concentraciones más altas, inhibe el crecimiento e induce la diferenciación terminal en las células A431. Esta respuesta dinámica al EGFR subraya la utilidad de la línea celular para explorar las vías de señalización celular y el ciclo celular en el contexto del cáncer.

Los modelos de xenoinjerto derivados de células A-431 se utilizan para estudiar el comportamiento tumoral en un entorno vivo y evaluar terapias contra el cáncer. Estos modelos ayudan a evaluar cómo los tratamientos, como la suplementación con EGF y la radiación, afectan al crecimiento tumoral y ponen de relieve la sensibilidad de las células a la radiación.

En resumen, la línea celular A-431 constituye un valioso modelo celular de carcinoma epidermoide humano que facilita una comprensión más profunda de la señalización del EGFR, la biología tumoral y el desarrollo de intervenciones terapéuticas dirigidas a combatir el carcinoma epidermoide y otros cánceres relacionados.

Pañuelo de papel
Epidermoide
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
  • A-431
  • A431/P

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial, poligonal plana
Tumorigénico
Sí, en ratones inmunodeprimidos
Cariotipo
Seis cromosomas marcadores con reordenamientos: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) y dic(14,18). Amplificación del oncogén C-MYC en 8q24 en dos cromosomas marcadores: dup(8)(q24) y der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Identificadores

Referencia
A431 (número de catálogo 300112 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Sitios de unión al EGF
Expresión de proteínas
P53 positivo
Isoenzimas
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Perfil mutacional
BRAF V600Ewt
Productos
HBp17

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 dará lugar a una monocapa confluente en 4 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
85 años