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A431-Zellen
Gewebe
Epidermoid
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Synonyme
A-431, A431/P

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A431-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300112

Die Zelllinie A431, die aus einem soliden epidermoiden Karzinom einer 85-jährigen Patientin gewonnen wurde, ist eine menschliche Tumorzelllinie mit epithelialer Morphologie...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die A431-Zelllinie, die von einem soliden Epidermoid-Karzinom-Tumor einer 85-jährigen Patientin stammt, ist eine menschliche Tumorzelllinie mit epithelialer Morphologie, die typischerweise in Clustern wächst. Die A-431-Zelllinie wird häufig in Krebs-, Toxizitäts- und Immunonkologiestudien eingesetzt und dient aufgrund ihrer hohen Rezeptordichte als positive Kontrolle für die Expression des epidermalen Wachstumsfaktors (EGF).

Nach der Bindung von EGF an seinen Rezeptor (EGFR) auf der Oberfläche von A431-Zellen kommt es zu einer raschen Tyrosinphosphorylierung von Membranproteinen, die eine Kaskade von intrazellulären Signalwegen auslöst. Zu diesen Signalwegen gehören der MAPK/ERK- und der PI3K/AKT-Signalweg, die bei der Regulierung der Zellzyklusprogression, des Überlebens und der Proliferation eine zentrale Rolle spielen.

EGFR stimuliert die Zellproliferation bei niedrigen Konzentrationen, während er bei höheren Konzentrationen das Wachstum hemmt und eine terminale Differenzierung in A431-Zellen bewirkt. Diese dynamische Reaktion auf EGFR unterstreicht den Nutzen der Zelllinie bei der Erforschung von Zellsignalwegen und des Zellzyklus im Zusammenhang mit Krebs.

Aus A-431-Zellen abgeleitete Xenograft-Modelle werden zur Untersuchung des Tumorverhaltens in einer lebenden Umgebung und zur Evaluierung von Krebstherapien verwendet. Anhand dieser Modelle lässt sich beurteilen, wie sich Behandlungen wie EGF-Supplemente und Bestrahlung auf das Tumorwachstum auswirken, und die Empfindlichkeit der Zellen gegenüber Bestrahlung wird deutlich.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die A-431-Zelllinie als Zellmodell für das menschliche Epidermoidkarzinom von unschätzbarem Wert ist und ein tieferes Verständnis der EGFR-Signalübertragung, der Tumorbiologie und der Entwicklung von therapeutischen Maßnahmen zur Bekämpfung des Epidermoidkarzinoms und anderer verwandter Krebsarten ermöglicht.

Gewebe
Epidermoid
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Synonyme
  • A-431
  • A431/P

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich, flach polygonal
Tumorauslösend
Ja, bei immunsupprimierten Mäusen
Karyotyp
Sechs Marker-Chromosomen mit Rearrangements: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) und dic(14,18). Amplifikation des C-MYC-Onkogens auf 8q24 in zwei Marker-Chromosomen: dup(8)(q24) und der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Bezeichner

Quellenangabe
A431 (Cytion Katalognummer 300112)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
EGF-Bindungsstellen
Proteinexpression
P53 positiv
Isoenzyme
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutationsprofil
BRAF V600Ewt
Produkte
HBp17

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm² führen innerhalb von 4 Tagen zu einer konfluenten Monoschicht.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und adhärieren lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
85 Jahre