İçeriğe atla
A431 Hücreleri
Doku
Epidermoid
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
A-431, A431/P

A431 Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300112

85 yaşındaki bir kadın hastada görülen solid epidermoid karsinom tümöründen elde edilen A431 hücre hattı, epitelyal morfolojiye sahip bir insan tümör hücre hattıdır...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

85 yaşında bir kadın hastadaki solid epidermoid karsinom tümöründen türetilen A431 hücre hattı, tipik olarak kümeler halinde büyüyen, epitelyal morfolojiye sahip bir insan tümör hücre hattıdır. A-431 hücre hattı kanser, toksisite ve immüno-onkoloji çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır ve yüksek reseptör yoğunluğu nedeniyle epidermal büyüme faktörü (EGF) reseptör ekspresyonu için pozitif bir kontrol görevi görmektedir.

EGF'nin A431 hücrelerinin yüzeyindeki reseptörüne (EGFR) bağlanması üzerine, membran proteinlerinin hızlı bir tirozin fosforilasyonu meydana gelir ve hücre içi sinyal yollarının bir kaskadını tetikler. Bu yolaklar, hücre döngüsü ilerlemesi, hayatta kalma ve çoğalmanın düzenlenmesinde çok önemli olan MAPK/ERK ve PI3K/AKT yolaklarını içerir.

EGFR düşük konsantrasyonlarda hücre proliferasyonunu uyarırken, daha yüksek konsantrasyonlarda büyümeyi inhibe eder ve A431 hücrelerinde terminal farklılaşmayı indükler. EGFR'ye verilen bu dinamik yanıt, hücre hattının kanser bağlamında hücre sinyal yollarını ve hücre döngüsünü keşfetmedeki faydasının altını çizmektedir.

A-431 hücresinden türetilen ksenograft modelleri, canlı bir ortamda tümör davranışını incelemek ve antikanser tedavilerini değerlendirmek için kullanılır. Bu modeller, EGF takviyesi ve radyasyon gibi tedavilerin tümör büyümesini nasıl etkilediğini değerlendirmeye yardımcı olur ve hücrelerin radyasyona karşı duyarlılığını vurgular.

Özetle, A-431 hücre hattı çok değerli bir insan epidermoid karsinom hücre modeli olarak hizmet etmekte ve EGFR sinyalizasyonunun, tümör biyolojisinin daha iyi anlaşılmasını ve epidermoid karsinom ve diğer ilgili kanserlerle mücadeleye yönelik terapötik müdahalelerin geliştirilmesini kolaylaştırmaktadır.

Doku
Epidermoid
Hastalık
Skuamöz hücreli karsinom
Eş anlamlılar
  • A-431
  • A431/P

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri, düz poligonal
Tümör oluşturucu
Evet, bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde
Karyotip
Yeniden düzenlenmiş altı işaret kromozomu: der(6), der(7), der(17), der(21), dic(13,14) ve dic(14,18). İki işaret kromozomunda 8q24'te C-MYC onkogeninin amplifikasyonu: dup(8)(q24) ve der(15)t(8,15)(q22,p11).

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A431 (Cytion katalog numarası 300112)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0037

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
EGF bağlayıcı bölgeler
Protein ekspresyonu
P53 pozitif
İzoenzimler
G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 2
Mutasyon profili
BRAF V600Ewt
Ürünler
HBp17

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2, 4 gün içinde birleşik tek tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
85 yıl