Cellules BEWO

Les cellules BeWo, une lignée cellulaire dérivée d'un choriocarcinome gestationnel malin du placenta mâle fœtal, sont devenues un modèle in vitro largement utilisé pour l'étude du placenta.

La fusion des cellules pendant la phase de syncytialisation du trophoblaste humain au cours du développement placentaire est l'un des événements les plus importants et pourtant les moins bien compris. En raison de la difficulté d'étudier ce processus dans un placenta in vivo, les cellules BeWo sont utilisées comme modèle de culture cellulaire pour simuler la syncytialisation in vivo du trophoblaste villositaire placentaire.

Ces cellules présentent un phénotype de type épithélial et sont adhérentes. Le sous-clone b30 des cellules BeWo est particulièrement utile pour étudier l'absorption et le transport des nutriments en raison de sa croissance dense sur des membranes perméables.

La CK 7 et la E-cadhérine sont des marqueurs moléculaires exprimés par les cellules BeWo. La VE-cadhérine est présente dans les cellules BeWo et est renforcée par le traitement à la forskoline. Les cellules expriment également la kératine et sont positives pour l'isoenzyme B de la G6PD. Le caryotype des cellules BeWo est le nombre modal = 86, avec un intervalle de 71 à 178, et le nombre de lignes souches est hypotétraploïde.

Le caryotype est relativement stable à l'intérieur du nombre de souches. Les cellules BeWo sécrètent diverses hormones, notamment la gonadotrophine chorionique humaine (hCG), la somatomammotrophine chorionique humaine (lactogène placentaire) et des hormones stéroïdes telles que l'estrone, l'estriol et l'estradiol.

Cependant, les niveaux de β-hCG et d'estradiol sécrétés par les cellules BeWo sont inférieurs à ceux sécrétés par d'autres lignées cellulaires dérivées du choriocarcinome telles que JEG-3. Après traitement à la forskoline, la sécrétion de β-hCG dans les cellules BeWo augmente pour atteindre un niveau similaire à celui observé dans les autres lignées cellulaires dérivées du choriocarcinome. En outre, le traitement à la forskoline augmente également les niveaux de progestérone sécrétés par les cellules BeWo.

En résumé, les cellules BeWo sont un modèle in vitro largement utilisé pour étudier le développement placentaire et le processus de syncytialisation du trophoblaste humain. Elles présentent un phénotype de type épithélial, expriment divers marqueurs moléculaires et sécrètent plusieurs hormones, dont la hCG, le lactogène placentaire et les hormones stéroïdiennes. Dans l'ensemble, les cellules BeWo constituent un outil précieux pour l'étude des processus complexes impliqués dans le développement du placenta.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie