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BEWOセル
ティッシュ
プラセンタ
病気
絨毛がん
転移部位
脳
同義語
BeWo, Be Wo, Be-Wo

BEWOセル

Cell line · 製品番号 300123

BeWo細胞は、胎児の男性胎盤由来の悪性絨毛癌から樹立された細胞株であり、…の研究において広く用いられているin vitroモデルとなっている。

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01概要

説明

BeWo細胞は、男性胎盤の悪性妊娠性絨毛癌由来の細胞株であり、胎盤を研究するためのin vitroモデルとして広く用いられている。

胎盤発生過程におけるヒト絨毛細胞合胞化期における細胞間融合は、最も重要でありながら最も理解されていない出来事の一つである。胎盤におけるこのプロセスをin vivoで研究することは困難であるため、BeWo細胞が胎盤絨毛絨毛のin vivoでの合胞化をシミュレートする細胞培養モデルとして利用されている。

これらの細胞は上皮様表現型を示し、接着性がある。BeWo細胞のb30サブクローンは、透過性膜上で密に増殖するため、栄養の取り込みと輸送の研究に特に有用である。

CK 7とE-カドヘリンは、BeWo細胞が発現する分子マーカーである。VE-カドヘリンはBeWo細胞で認められ、フォルスコリンで処理すると増強される。この細胞はケラチンも発現し、G6PD、Bアイソザイムも陽性である。BeWo細胞の核型は様式数=86で、71から178の範囲にあり、幹細胞数は4倍体である。

核型は幹細胞数の範囲内で比較的安定している。BeWo細胞は、ヒト絨毛性ゴナドトロピン(hCG)、ヒト絨毛性ソマトマンモトロピン(胎盤性ラクトゲン)、エストロン、エストリオール、エストラジオールなどのステロイドホルモンなど、様々なホルモンを分泌する。

しかし、BeWo細胞から分泌されるβ-hCGとエストラジオールのレベルは、JEG-3などの他の絨毛がん由来細胞株から分泌されるレベルよりも低い。フォルスコリン処理により、BeWo細胞におけるβ-hCGの分泌は、他の絨毛がん由来細胞株で観察されるのと同様のレベルまで増加した。さらに、フォルスコリン処理により、BeWo細胞から分泌されるプロゲステロンレベルも上昇する。

要約すると、BeWo細胞は胎盤の発生とヒト絨毛の合胞化過程を研究するためのin vitroモデルとして広く用いられている。BeWo細胞は上皮様表現型を示し、様々な分子マーカーを発現し、hCG、胎盤ラクトゲン、ステロイドホルモンなど複数のホルモンを分泌する。全体として、BeWo細胞は胎盤発生に関与する複雑なプロセスを研究するための貴重なツールである。

ティッシュ
プラセンタ
病気
絨毛がん
転移部位
脳
同義語
  • BeWo
  • Be Wo
  • Be-Wo

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様

04識別子

引用
BEWO(サイシオン カタログ番号 300123)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0044

05発現と感受性

アイソザイム
G6PD、B
ウイルス感受性
ポリオウイルス3、水疱性口内炎(インディアナ州)
逆転写酵素
ネガティブ
製品
プロゲステロン、ヒト絨毛性ソマトマンモトロピン(胎盤性ラクトゲン)、エストロゲン、エストロン、エストリオール、エストラジオール、ケラチン

06取り扱いと飼育

培地
ハムF12K培地、w:2.0 mM L-グルタミン、w:2.0 mM ピルビン酸ナトリウム、w:2.5 g/L NaHCO3(Cytion article number 820608a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1×10⁴細胞/cm²の播種密度が推奨される。
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
胎児