Komórki BEWO

Komórki BeWo, linia komórkowa pochodząca ze złośliwego raka kosmówki łożyska płodu męskiego, stały się szeroko stosowanym modelem in vitro do badania łożyska.

Fuzja komórka-komórka podczas fazy syncytializacji ludzkiego trofoblastu podczas rozwoju łożyska jest jednym z najważniejszych, ale najmniej poznanych zdarzeń. Ze względu na trudności w badaniu tego procesu w łożysku in vivo, komórki BeWo są wykorzystywane jako model hodowli komórkowej do symulacji in vivo syncytializacji trofoblastu kosmków łożyska.

Komórki te wykazują fenotyp podobny do nabłonka i są przylegające. Podklon b30 komórek BeWo jest szczególnie przydatny do badania pobierania i transportu składników odżywczych ze względu na gęsty wzrost na przepuszczalnych błonach.

CK 7 i E-kadheryna są markerami molekularnymi wyrażanymi przez komórki BeWo. VE-kadheryna występuje w komórkach BeWo i ulega wzmocnieniu po podaniu forskoliny. Komórki wykazują również ekspresję keratyny i są dodatnie pod względem izoenzymu B G6PD. Kariotyp komórek BeWo ma liczbę modalną = 86, z zakresem od 71 do 178, a liczba linii macierzystych jest hipotetraploidalna.

Kariotyp jest względnie stabilny w obrębie liczby linii macierzystej. Komórki BeWo wydzielają różne hormony, w tym ludzką gonadotropinę kosmówkową (hCG), ludzką somatomammotropinę kosmówkową (laktogen łożyskowy) oraz hormony steroidowe, takie jak estron, estriol i estradiol.

Jednak poziomy β-hCG i estradiolu wydzielane przez komórki BeWo są niższe niż te wydzielane przez inne linie komórkowe pochodzące z choriocarcinoma, takie jak JEG-3. Po leczeniu forskoliną wydzielanie β-hCG w komórkach BeWo wzrasta do poziomu podobnego do obserwowanego w innych liniach komórkowych pochodzących z raka kosmówki. Co więcej, leczenie forskoliną zwiększa również poziom progesteronu wydzielanego przez komórki BeWo.

Podsumowując, komórki BeWo są szeroko stosowanym modelem in vitro do badania rozwoju łożyska i procesu syncytializacji ludzkiego trofoblastu. Wykazują fenotyp podobny do nabłonka, wyrażają różne markery molekularne i wydzielają wiele hormonów, w tym hCG, laktogen łożyskowy i hormony steroidowe. Ogólnie rzecz biorąc, komórki BeWo są cennym narzędziem do badania złożonych procesów związanych z rozwojem łożyska.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym