תאי BEWO
Cell line · Product number 300123
BeWo cells, a cell line derived from malignant gestational choriocarcinoma of the fetal male placenta, have become a widely used in vitro model for studyi...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי BeWo, קו תאים שמקורו בקוריוקרצינומה ממאירה של השליה העוברית הזכרית, הפכו למודל נפוץ במבחנה לחקר השליה.
ההתמזגות בין תאים במהלך שלב הסינציטיזציה של הטרופובלסט האנושי במהלך התפתחות השליה היא אחד האירועים המשמעותיים ביותר, אך גם הפחות מובנים. בשל הקושי לחקור תהליך זה בשליה in vivo, תאי BeWo משמשים כמודל לתרבית תאים כדי לדמות סינציטיזציה in vivo של הטרופובלסט הזיפי של השליה.
תאים אלה מציגים פנוטיפ דמוי אפיתל והם דבקים. תת-השיבוט b30 של תאי BeWo שימושי במיוחד לחקר ספיגת חומרים מזינים והובלתם בשל צמיחתו הצפופה על ממברנות חדירות.
CK 7 ו-E-cadherin הם סמנים מולקולריים המתבטאים בתאי BeWo. VE-cadherin נמצא בתאי BeWo ומועצם לאחר טיפול ב-forskolin. התאים מבטאים גם קרטין והם חיוביים ל-G6PD, איזואנזים B. הקריוטיפ של תאי BeWo הוא מספר מודאלי = 86, בטווח של 71 עד 178, ומספר הגזע הוא היפוטטרהפלואידי.
הקריוטיפ יציב יחסית בתוך מספר קו הגזע. תאי BeWo מפרישים הורמונים שונים, כולל גונדוטרופין כוריוני אנושי (hCG), סומטומאמוטרופין כוריוני אנושי (לקטוגן שליה) והורמונים סטרואידים כגון אסטרון, אסטריול ואסטרדיול.
עם זאת, רמות ה-β-hCG והאסטרדיול המופרשות על ידי תאי BeWo נמוכות מאלה המופרשות על ידי קווי תאים אחרים שמקורם בקוריוקרצינומה, כגון JEG-3. לאחר טיפול ב-Forskolin, הפרשת ה-β-hCG בתאי BeWo עולה לרמה דומה לזו שנצפתה בקווי תאים אחרים שמקורם בקוריוקרצינומה. יתר על כן, טיפול ב-Forskolin מגביר גם את רמות הפרוגסטרון המופרשות על ידי תאי BeWo.
לסיכום, תאי BeWo הם מודל in vitro נפוץ לחקר התפתחות השליה ותהליך הסינציטיזציה של הטרופובלסט האנושי. הם מציגים פנוטיפ דמוי אפיתל, מבטאים סמנים מולקולריים שונים ומפרישים הורמונים מרובים, כולל hCG, לקטוגן של השליה והורמונים סטרואידים. בסך הכל, תאי BeWo הם כלי חשוב לחקר התהליכים המורכבים הכרוכים בהתפתחות השליה.
- Tissue
- שליה
- Disease
- כוריוקרצינומה
- Metastatic site
- מוח
- Synonyms
- BeWo
- Be Wo
- Be-Wo
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
04Identifiers
- Citation
- BEWO (מספר קטלוגי Cytion 300123)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0044
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- G6PD, B
- Virus susceptibility
- פוליווירוס 3, סטומטיטיס שלפוחיתית (אינדיאנה)
- Reverse transcriptase
- שלילי
- Products
- פרוגסטרון, סומטומאמוטרופין כוריוני אנושי (לקטוגן שליה), אסטרוגן, אסטרון, אסטריול, אסטרדיול, קרטין
06Handling and culture
- Culture medium
- Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820608a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- מומלצת צפיפות זריעה של 1 x 104 תאים/סמ"ר.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- עובר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)