Skip to content
תאי BEWO
Tissue
שליה
Disease
כוריוקרצינומה
Metastatic site
מוח
Synonyms
BeWo, Be Wo, Be-Wo

Documents

תאי BEWO

Cell line · Product number 300123

BeWo cells, a cell line derived from malignant gestational choriocarcinoma of the fetal male placenta, have become a widely used in vitro model for studyi...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי BeWo, קו תאים שמקורו בקוריוקרצינומה ממאירה של השליה העוברית הזכרית, הפכו למודל נפוץ במבחנה לחקר השליה.

ההתמזגות בין תאים במהלך שלב הסינציטיזציה של הטרופובלסט האנושי במהלך התפתחות השליה היא אחד האירועים המשמעותיים ביותר, אך גם הפחות מובנים. בשל הקושי לחקור תהליך זה בשליה in vivo, תאי BeWo משמשים כמודל לתרבית תאים כדי לדמות סינציטיזציה in vivo של הטרופובלסט הזיפי של השליה.

תאים אלה מציגים פנוטיפ דמוי אפיתל והם דבקים. תת-השיבוט b30 של תאי BeWo שימושי במיוחד לחקר ספיגת חומרים מזינים והובלתם בשל צמיחתו הצפופה על ממברנות חדירות.

CK 7 ו-E-cadherin הם סמנים מולקולריים המתבטאים בתאי BeWo. VE-cadherin נמצא בתאי BeWo ומועצם לאחר טיפול ב-forskolin. התאים מבטאים גם קרטין והם חיוביים ל-G6PD, איזואנזים B. הקריוטיפ של תאי BeWo הוא מספר מודאלי = 86, בטווח של 71 עד 178, ומספר הגזע הוא היפוטטרהפלואידי.

הקריוטיפ יציב יחסית בתוך מספר קו הגזע. תאי BeWo מפרישים הורמונים שונים, כולל גונדוטרופין כוריוני אנושי (hCG), סומטומאמוטרופין כוריוני אנושי (לקטוגן שליה) והורמונים סטרואידים כגון אסטרון, אסטריול ואסטרדיול.

עם זאת, רמות ה-β-hCG והאסטרדיול המופרשות על ידי תאי BeWo נמוכות מאלה המופרשות על ידי קווי תאים אחרים שמקורם בקוריוקרצינומה, כגון JEG-3. לאחר טיפול ב-Forskolin, הפרשת ה-β-hCG בתאי BeWo עולה לרמה דומה לזו שנצפתה בקווי תאים אחרים שמקורם בקוריוקרצינומה. יתר על כן, טיפול ב-Forskolin מגביר גם את רמות הפרוגסטרון המופרשות על ידי תאי BeWo.

לסיכום, תאי BeWo הם מודל in vitro נפוץ לחקר התפתחות השליה ותהליך הסינציטיזציה של הטרופובלסט האנושי. הם מציגים פנוטיפ דמוי אפיתל, מבטאים סמנים מולקולריים שונים ומפרישים הורמונים מרובים, כולל hCG, לקטוגן של השליה והורמונים סטרואידים. בסך הכל, תאי BeWo הם כלי חשוב לחקר התהליכים המורכבים הכרוכים בהתפתחות השליה.

Tissue
שליה
Disease
כוריוקרצינומה
Metastatic site
מוח
Synonyms
  • BeWo
  • Be Wo
  • Be-Wo

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
BEWO (מספר קטלוגי Cytion 300123)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0044

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
G6PD, B
Virus susceptibility
פוליווירוס 3, סטומטיטיס שלפוחיתית (אינדיאנה)
Reverse transcriptase
שלילי
Products
פרוגסטרון, סומטומאמוטרופין כוריוני אנושי (לקטוגן שליה), אסטרוגן, אסטרון, אסטריול, אסטרדיול, קרטין

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820608a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
מומלצת צפיפות זריעה של 1 x 104 תאים/סמ"ר.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
עובר