Skip to content
เซลล์ BEWO
Tissue
รก
Disease
โคริโอคาร์ซิโนมา
Metastatic site
สมอง
Synonyms
BeWo, Be Wo, Be-Wo

Documents

เซลล์ BEWO

Cell line · Product number 300123

BeWo cells, a cell line derived from malignant gestational choriocarcinoma of the fetal male placenta, have become a widely used in vitro model for studyi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ BeWo ซึ่งเป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ได้มาจากมะเร็งชนิดร้ายแรงของรกของทารกเพศชายในครรภ์ ได้กลายเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับรก

การหลอมรวมเซลล์ระหว่างเซลล์ในระยะซินซิเทียมของโทโพรบลาสต์มนุษย์ระหว่างการพัฒนาของรก เป็นหนึ่งในเหตุการณ์ที่สำคัญที่สุดแต่ยังเข้าใจน้อยที่สุด เนื่องจากความยากลำบากในการศึกษาขั้นตอนนี้ในรกในร่างกายจริง จึงมีการใช้เซลล์ BeWo เป็นแบบจำลองการเพาะเลี้ยงเซลล์เพื่อจำลองการเกิดซินซิเทียมของโทโพรบลาสต์ของวิลลัสในรกในร่างกายจริง

เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะคล้ายเยื่อบุผิวและยึดติดกันได้ดี ซับโคลน b30 ของเซลล์ BeWo มีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาการดูดซึมและการขนส่งสารอาหาร เนื่องจากมีการเจริญเติบโตหนาแน่นบนเยื่อกั้นที่ซึมผ่านได้

CK 7 และ E-cadherin เป็นตัวบ่งชี้โมเลกุลที่แสดงออกโดยเซลล์ BeWo ส่วน VE-cadherin พบในเซลล์ BeWo และเพิ่มขึ้นเมื่อได้รับการรักษาด้วยฟอร์สโคลิน เซลล์เหล่านี้ยังแสดงเคราตินและมีผลบวกต่อ G6PD, B isoenzymeลักษณะทางพันธุกรรมของเซลล์ BeWo คือ จำนวนโมดอล = 86 โดยมีช่วงตั้งแต่ 71 ถึง 178 และหมายเลขสายพันธุ์ต้นกำเนิดคือ hypotetraploid.

คาริโอไทป์มีความเสถียรค่อนข้างมากภายในจำนวนสเต็มไลน์ เซลล์ BeWo ผลิตฮอร์โมนต่าง ๆ รวมถึงฮอร์โมนโคริออนิกโกนาโดโทรปินของมนุษย์ (hCG), ฮอร์โมนโคริออนิกโซมาโตแมมมาโทรปิน (แลคโตเจนของรก), และฮอร์โมนสเตียรอยด์ในรูปแบบของเอสโตรน, เอสทรีออล, และเอสตราไดออล

อย่างไรก็ตาม ระดับของ β-hCG และเอสตราไดออลที่ถูกหลั่งโดยเซลล์ BeWo นั้นต่ำกว่าที่หลั่งโดยเซลล์ไลน์อื่น ๆ ที่มาจากเซลล์มะเร็งของรก เช่น JEG-3 เมื่อได้รับการรักษาด้วย Forskolin การหลั่ง β-hCG ในเซลล์ BeWo จะเพิ่มขึ้นถึงระดับที่ใกล้เคียงกับที่สังเกตได้ในเซลล์ไลน์อื่น ๆ ที่มาจากเซลล์มะเร็งของรกนอกจากนี้ การรักษาด้วยฟอร์สโคลินยังเพิ่มระดับโปรเจสเตอโรนที่ถูกหลั่งโดยเซลล์ BeWo อีกด้วย

โดยสรุป เซลล์ BeWo เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการศึกษาการพัฒนาของรกและกระบวนการซินซิทิอัสของโทโพรบลาสต์ในมนุษย์ เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว แสดงออกของตัวบ่งชี้โมเลกุลต่างๆ และหลั่งฮอร์โมนหลายชนิด รวมถึง hCG, แลคโตเจนของรก และฮอร์โมนสเตียรอยด์ โดยรวมแล้ว เซลล์ BeWo เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาความซับซ้อนของกระบวนการที่เกี่ยวข้องในการพัฒนาของรก

Tissue
รก
Disease
โคริโอคาร์ซิโนมา
Metastatic site
สมอง
Synonyms
  • BeWo
  • Be Wo
  • Be-Wo

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
BEWO (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300123)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0044

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
จี6พีดี, บี
Virus susceptibility
โปลิโอไวรัส 3, โรคปากและเท้าเปื่อย (อินเดียนา)
Reverse transcriptase
เชิงลบ
Products
โปรเจสเตอโรน, ฮอร์โมนโคริออนิกซอมโตมาแมมโมโทรปินของมนุษย์ (แลคโตเจนจากรก), เอสโตรเจน, เอสทรอน, เอสทริออล, เอสตราไดออล, เคราติน

06Handling and culture

Culture medium
Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamine, w: 2.0 mM Sodium pyruvate, w: 2.5 g/L NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820608a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
แนะนำให้ใช้ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงที่ 1 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์