Células BEWO

As células BeWo, uma linhagem celular derivada do coriocarcinoma gestacional maligno da placenta fetal masculina, tornaram-se um modelo in vitro amplamente utilizado para o estudo da placenta.

A fusão célula-célula durante a fase de sincitialização do trofoblasto humano no desenvolvimento placentário é um dos eventos mais significativos, mas ainda assim menos compreendidos. Devido à dificuldade de estudar esse processo na placenta in vivo, as células BeWo são utilizadas como modelo de cultura celular para simular a sincicialização in vivo do trofoblasto vilosário placentário.

Essas células apresentam um fenótipo semelhante ao epitelial e são aderentes. O subclone b30 das células BeWo é particularmente útil para o estudo da captação e do transporte de nutrientes devido ao seu crescimento denso sobre membranas permeáveis.

CK 7 e E-caderina são marcadores moleculares expressos pelas células BeWo. A VE-caderina é encontrada nas células BeWo e sua expressão é aumentada após o tratamento com forskolina. As células também expressam queratina e são positivas para a isoenzima B da G6PD. O cariótipo das células BeWo apresenta número modal = 86, com variação de 71 a 178, e o número da linhagem-tronco é hipotetraplóide.

O cariótipo é relativamente estável dentro do número da linhagem-tronco. As células BeWo secretam vários hormônios, incluindo a gonadotrofina coriônica humana (hCG), a somatomamotropina coriônica humana (lactógeno placentário) e hormônios esteróides como a estrona, o estriol e o estradiol.

No entanto, os níveis de β-hCG e estradiol secretados pelas células BeWo são mais baixos do que aqueles secretados por outras linhagens celulares derivadas de coriocarcinoma, como a JEG-3. Após o tratamento com forskolina, a secreção de β-hCG nas células BeWo aumenta para um nível semelhante ao observado nas outras linhagens celulares derivadas do coriocarcinoma. Além disso, o tratamento com forskolina também aumenta os níveis de progesterona secretados pelas células BeWo.

Em resumo, as células BeWo são um modelo in vitro amplamente utilizado para o estudo do desenvolvimento placentário e do processo de sincicialização do trofoblasto humano. Elas apresentam um fenótipo semelhante ao epitelial, expressam vários marcadores moleculares e secretam múltiplos hormônios, incluindo hCG, lactogênio placentário e hormônios esteróides. De modo geral, as células BeWo são uma ferramenta valiosa para investigar os processos complexos envolvidos no desenvolvimento placentário.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.