Preskoči na vsebino
BEWO Cells
Tkivo
Placenta
Bolezen
Horiokarcinom
Mesto metastaze
Možgani
Sinonimi
BeWo, Be Wo, Be-Wo

Dokumenti

BEWO Cells

Cell line · Številka izdelka 300123

Celice BeWo, celična linija, pridobljena iz malignega gestacijskega horionkarcinoma placente moškega ploda, so postale široko uporabljen in vitro model za preučevanje...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice BeWo, celična linija, pridobljena iz malignega gestacijskega horokarcinoma fetalne moške placente, so postale pogosto uporabljen in vitro model za preučevanje placente.

Fuzija celic med fazo sincifikacije človeškega trofoblasta med razvojem placente je eden najpomembnejših, vendar najmanj razumljenih dogodkov. Zaradi težav pri preučevanju tega procesa v placenti in vivo so celice BeWo uporabljene kot model celične kulture za simulacijo sincitizacije vilusnega trofoblasta placente in vivo.

Te celice imajo epitelijski fenotip in so adherentne. Podklon b30 celic BeWo je zaradi goste rasti na prepustnih membranah še posebej uporaben za preučevanje sprejemanja in prenosa hranil.

CK 7 in E-kaderin sta molekularna označevalca, ki ju izražajo celice BeWo. VE-kadherin je prisoten v celicah BeWo in se okrepi pri zdravljenju s forskolom. Celice izražajo tudi keratin in so pozitivne na izoencim G6PD, B. Kariotip celic BeWo ima modalno število = 86, z razponom od 71 do 178, matično število pa je hipotraploidno.

Kariotip je relativno stabilen znotraj matičnega števila. Celice BeWo izločajo različne hormone, vključno s človeškim horionskim gonadotropinom (hCG), človeškim horionskim somatomammotropinom (placentarnim laktogenom) in steroidnimi hormoni, kot so estron, estriol in estradiol.

Vendar so ravni β-hCG in estradiola, ki jih izločajo celice BeWo, nižje od tistih, ki jih izločajo druge celične linije, ki so nastale iz horokarcinoma, kot je JEG-3. Po zdravljenju z forskolinom se izločanje β-hCG v celicah BeWo poveča na raven, ki je podobna ravni, opaženi pri drugih celičnih linijah, ki so nastale iz horokarcinoma. Poleg tega zdravljenje s forskolinom poveča tudi raven progesterona, ki ga izločajo celice BeWo.

Če povzamemo, so celice BeWo široko uporabljen in vitro model za preučevanje razvoja placente in procesa sincifikacije človeškega trofoblasta. Imajo epitelijski fenotip, izražajo različne molekularne označevalce in izločajo več hormonov, vključno s hCG, placentarnim laktogenom in steroidnimi hormoni. Na splošno so celice BeWo dragoceno orodje za raziskovanje zapletenih procesov, vključenih v razvoj placente.

Tkivo
Placenta
Bolezen
Horiokarcinom
Mesto metastaze
Možgani
Sinonimi
  • BeWo
  • Be Wo
  • Be-Wo

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
BEWO (kataloška številka Cytion 300123)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0044

05Izražanje in dovzetnost

Izoenzimi
G6PD, B
Občutljivost na virus
Poliovirus 3, vezikularni stomatitis (Indiana)
Reversna transkriptaza
Negativni
Izdelki
Progesteron, humani horionski somatommotropin (placentarni laktogen), estrogen, estron, estriol, estradiol, keratin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-glutamin, w: 2,0 mM natrijev piruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820608a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
Priporočena gostota posejanja je 1 x 104 celic/cm2.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod