İçeriğe atla
BEWO Hücreleri
Doku
Plasenta
Hastalık
Koriokarsinom
Metastaz yeri
Beyin
Eş anlamlılar
BeWo, Be Wo, Be-Wo

BEWO Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300123

Fetal erkek plasentasındaki malign gestasyonel koriokarsinomdan türetilen BeWo hücreleri, araştırmalar için yaygın olarak kullanılan bir in vitro model haline gelmiştir...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Fetal erkek plasentasının malign gestasyonel koriokarsinomundan türetilen bir hücre hattı olan BeWo hücreleri, plasentayı incelemek için yaygın olarak kullanılan bir in vitro model haline gelmiştir.

Plasental gelişim sırasında insan trofoblastı sinsitiyalizasyon fazı sırasında hücre-hücre füzyonu, en önemli ancak en az anlaşılmış olaylardan biridir. Bu süreci in vivo bir plasentada incelemenin zorluğu nedeniyle, BeWo hücreleri plasental villöz trofoblastın in vivo sinsityalizasyonunu simüle etmek için bir hücre kültürü modeli olarak kullanılmaktadır.

Bu hücreler epitel benzeri bir fenotip sergiler ve yapışıktır. BeWo hücrelerinin b30 alt klonu, geçirgen membranlar üzerinde yoğun büyümesi nedeniyle besin alımı ve taşınmasını incelemek için özellikle yararlıdır.

CK 7 ve E-cadherin, BeWo hücreleri tarafından ifade edilen moleküler belirteçlerdir. VE-cadherin BeWo hücrelerinde bulunur ve forskolin ile muamele edildiğinde artar. Hücreler ayrıca keratin eksprese eder ve G6PD, B izoenzimi için pozitiftir. BeWo hücrelerinin karyotipi modal sayı = 86 olup 71 ila 178 aralığındadır ve kök çizgi sayısı hipotetraploiddir.

Karyotip, kök çizgisi sayısı içinde nispeten sabittir. BeWo hücreleri insan koryonik gonadotropini (hCG), insan koryonik somatomammotropini (plasental laktojen) ve östron, östriol ve östradiol gibi steroid hormonları dahil olmak üzere çeşitli hormonlar salgılar.

Bununla birlikte, BeWo hücreleri tarafından salgılanan β-hCG ve östradiol seviyeleri, JEG-3 gibi diğer koriokarsinom türevi hücre hatları tarafından salgılananlardan daha düşüktür. Forskolin tedavisi üzerine, BeWo hücrelerinde β-hCG salgılanması diğer koriokarsinom türevi hücre hatlarında gözlenene benzer bir seviyeye yükselir. Ayrıca, Forskolin tedavisi BeWo hücreleri tarafından salgılanan progesteron seviyelerini de artırmaktadır.

Özetle, BeWo hücreleri plasental gelişim ve insan trofoblast sinsitiyalizasyon sürecini incelemek için yaygın olarak kullanılan bir in vitro modeldir. Epitel benzeri bir fenotip sergilerler, çeşitli moleküler belirteçleri ifade ederler ve hCG, plasental laktojen ve steroid hormonları dahil olmak üzere çok sayıda hormon salgılarlar. Genel olarak, BeWo hücreleri plasental gelişimde yer alan karmaşık süreçleri araştırmak için değerli bir araçtır.

Doku
Plasenta
Hastalık
Koriokarsinom
Metastaz yeri
Beyin
Eş anlamlılar
  • BeWo
  • Be Wo
  • Be-Wo

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
BEWO (Cytion katalog numarası 300123)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0044

05İfade ve duyarlılık

İzoenzimler
G6PD, B
Virüse karşı duyarlılık
Poliovirüs 3, veziküler stomatit (Indiana)
Ters transkriptaz
Negatif
Ürünler
Progesteron, insan koryonik somatomammotropini (plasental laktojen), östrojen, östron, östriol, östradiol, keratin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
Ham's F12K Medium, w: 2.0 mM L-Glutamin, w: 2.0 mM Sodyum piruvat, w: 2.5 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820608a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2 tohumlama yoğunluğu önerilir.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs