Celle BEWO

Le cellule BeWo, una linea cellulare derivata dal coriocarcinoma gestazionale maligno della placenta fetale maschile, sono diventate un modello in vitro ampiamente utilizzato per lo studio della placenta.

La fusione cellula-cellula durante la fase di sincializzazione del trofoblasto umano durante lo sviluppo della placenta è uno degli eventi più significativi ma meno compresi. A causa della difficoltà di studiare questo processo in una placenta in vivo, le cellule BeWo sono utilizzate come modello di coltura cellulare per simulare la sincizializzazione in vivo del trofoblasto villoso placentare.

Queste cellule presentano un fenotipo simile a quello epiteliale e sono aderenti. Il sottoclone b30 delle cellule BeWo è particolarmente utile per studiare l'assorbimento e il trasporto dei nutrienti grazie alla sua crescita densa su membrane permeabili.

La CK 7 e la E-caderina sono marcatori molecolari espressi dalle cellule BeWo. La VE-caderina è presente nelle cellule BeWo ed è potenziata dal trattamento con forskolina. Le cellule esprimono anche cheratina e sono positive per l'isoenzima B G6PD. Il cariotipo delle cellule BeWo ha un numero modale = 86, con un intervallo compreso tra 71 e 178, e il numero di linee staminali è ipotetraploide.

Il cariotipo è relativamente stabile all'interno del numero di staminali. Le cellule BeWo secernono vari ormoni, tra cui la gonadotropina corionica umana (hCG), la somatomammotropina corionica umana (lattogeno placentare) e ormoni steroidei come estrone, estriolo ed estradiolo.

Tuttavia, i livelli di β-hCG e di estradiolo secreti dalle cellule BeWo sono inferiori a quelli secreti da altre linee cellulari derivate dal coriocarcinoma, come la JEG-3. Con il trattamento con forskolina, la secrezione di β-hCG nelle cellule BeWo aumenta fino a raggiungere un livello simile a quello osservato nelle altre linee cellulari derivate dal coriocarcinoma. Inoltre, il trattamento con forskolina aumenta anche i livelli di progesterone secreti dalle cellule BeWo.

In sintesi, le cellule BeWo sono un modello in vitro ampiamente utilizzato per studiare lo sviluppo della placenta e il processo di sincializzazione del trofoblasto umano. Esse presentano un fenotipo simile a quello epiteliale, esprimono vari marcatori molecolari e secernono diversi ormoni, tra cui hCG, lattogeno placentare e ormoni steroidei. Nel complesso, le cellule BeWo sono uno strumento prezioso per studiare i complessi processi coinvolti nello sviluppo della placenta.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia