.jpg)
- Szövet
- Placenta
- Betegség
- Choriocarcinoma
- Áttétes hely
- Agy
- Szinonimák
- BeWo, Be Wo, Be-Wo
Dokumentumok
BEWO sejtek
Cell line · Termékszám 300123
A BeWo-sejtek – egy, a magzati hím placentából származó rosszindulatú terhességi koriokarcinómából nyert sejtvonal – mára széles körben elterjedt in vitro modellé váltak a…
Személyre szabás / Ajánlások
- BEWO sejtekCell line€430.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
A BeWo sejtek, a magzati hím méhlepény rosszindulatú terhességi kório-karcinómájából származó sejtvonal, széles körben használt in vitro modellé vált a méhlepény tanulmányozására.
A humán trofoblasztok szinkializációs fázisa során a placenta fejlődése során bekövetkező sejt-sejt fúzió az egyik legjelentősebb, mégis legkevésbé megértett esemény. Mivel ezt a folyamatot nehéz in vivo placentában tanulmányozni, a BeWo sejteket használják sejttenyésztési modellként a placenta villás trofoblasztjának in vivo szinktializációjának szimulálására.
Ezek a sejtek epitélszerű fenotípust mutatnak és tapadnak. A BeWo sejtek b30-as szubklónja különösen hasznos a tápanyagfelvétel és -szállítás tanulmányozására, mivel sűrűn növekszik az áteresztő membránokon.
A CK 7 és az E-kadherin olyan molekuláris markerek, amelyeket a BeWo sejtek kifejeznek. A VE-kadherin megtalálható a BeWo sejtekben, és forskolin kezelés hatására fokozódik. A sejtek keratint is expresszálnak, és pozitívak a G6PD, B izoenzimre. A BeWo sejtek kariotípusa modális szám = 86, 71 és 178 közötti tartományban, és a törzsvonalszám hipotetraploid.
A kariotípus viszonylag stabil a törzsszámon belül. A BeWo sejtek különböző hormonokat választanak ki, beleértve a humán koriongonadotropint (hCG), a humán korionszomatomammotropint (placenta laktogén) és a szteroid hormonokat, mint az ösztron, az ösztriol és az ösztradiol.
A BeWo sejtek által szekretált β-hCG és ösztradiol szintje azonban alacsonyabb, mint a más choriocarcinoma-eredetű sejtvonalak, például a JEG-3 által szekretáltaké. Forskolin-kezelés hatására a BeWo sejtek β-hCG-szekréciója a többi koriokarcinóma-származék sejtvonalban megfigyelt szinthez hasonló szintre emelkedik. Továbbá a Forskolin-kezelés a BeWo sejtek által szekretált progeszteronszintet is növeli.
Összefoglalva, a BeWo sejtek széles körben használt in vitro modell a placenta fejlődésének és a humán trofoblasztok szinkronizációs folyamatának tanulmányozására. Epithelszerű fenotípust mutatnak, különböző molekuláris markereket expresszálnak, és több hormont szekretálnak, beleértve a hCG-t, a placenta laktogént és a szteroid hormonokat. Összességében a BeWo sejtek értékes eszközt jelentenek a placenta fejlődésében szerepet játszó komplex folyamatok vizsgálatára.
- Szövet
- Placenta
- Betegség
- Choriocarcinoma
- Áttétes hely
- Agy
- Szinonimák
- BeWo
- Be Wo
- Be-Wo
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű
04Azonosítók
- Hivatkozás
- BEWO (Cytion katalógusszám 300123)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0044
05Kifejeződés és fogékonyság
- Izoenzimek
- G6PD, B
- Vírusérzékenység
- Poliovírus 3, hólyagos szájgyulladás (Indiana)
- Fordított transzkriptáz
- Negatív
- Termékek
- Progeszteron, humán korionos szomatomammotropin (placenta laktogén), ösztrogén, ösztron, ösztriol, ösztradiol, keratin
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- Ham's F12K médium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820608a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Ültetési sűrűség
- 1 x 104 sejt/cm2 vetési sűrűség ajánlott.
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
- Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- Magzat
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen