Tartalomra ugrás
BEWO sejtek
Szövet
Placenta
Betegség
Choriocarcinoma
Áttétes hely
Agy
Szinonimák
BeWo, Be Wo, Be-Wo

Dokumentumok

BEWO sejtek

Cell line · Termékszám 300123

A BeWo-sejtek – egy, a magzati hím placentából származó rosszindulatú terhességi koriokarcinómából nyert sejtvonal – mára széles körben elterjedt in vitro modellé váltak a…

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A BeWo sejtek, a magzati hím méhlepény rosszindulatú terhességi kório-karcinómájából származó sejtvonal, széles körben használt in vitro modellé vált a méhlepény tanulmányozására.

A humán trofoblasztok szinkializációs fázisa során a placenta fejlődése során bekövetkező sejt-sejt fúzió az egyik legjelentősebb, mégis legkevésbé megértett esemény. Mivel ezt a folyamatot nehéz in vivo placentában tanulmányozni, a BeWo sejteket használják sejttenyésztési modellként a placenta villás trofoblasztjának in vivo szinktializációjának szimulálására.

Ezek a sejtek epitélszerű fenotípust mutatnak és tapadnak. A BeWo sejtek b30-as szubklónja különösen hasznos a tápanyagfelvétel és -szállítás tanulmányozására, mivel sűrűn növekszik az áteresztő membránokon.

A CK 7 és az E-kadherin olyan molekuláris markerek, amelyeket a BeWo sejtek kifejeznek. A VE-kadherin megtalálható a BeWo sejtekben, és forskolin kezelés hatására fokozódik. A sejtek keratint is expresszálnak, és pozitívak a G6PD, B izoenzimre. A BeWo sejtek kariotípusa modális szám = 86, 71 és 178 közötti tartományban, és a törzsvonalszám hipotetraploid.

A kariotípus viszonylag stabil a törzsszámon belül. A BeWo sejtek különböző hormonokat választanak ki, beleértve a humán koriongonadotropint (hCG), a humán korionszomatomammotropint (placenta laktogén) és a szteroid hormonokat, mint az ösztron, az ösztriol és az ösztradiol.

A BeWo sejtek által szekretált β-hCG és ösztradiol szintje azonban alacsonyabb, mint a más choriocarcinoma-eredetű sejtvonalak, például a JEG-3 által szekretáltaké. Forskolin-kezelés hatására a BeWo sejtek β-hCG-szekréciója a többi koriokarcinóma-származék sejtvonalban megfigyelt szinthez hasonló szintre emelkedik. Továbbá a Forskolin-kezelés a BeWo sejtek által szekretált progeszteronszintet is növeli.

Összefoglalva, a BeWo sejtek széles körben használt in vitro modell a placenta fejlődésének és a humán trofoblasztok szinkronizációs folyamatának tanulmányozására. Epithelszerű fenotípust mutatnak, különböző molekuláris markereket expresszálnak, és több hormont szekretálnak, beleértve a hCG-t, a placenta laktogént és a szteroid hormonokat. Összességében a BeWo sejtek értékes eszközt jelentenek a placenta fejlődésében szerepet játszó komplex folyamatok vizsgálatára.

Szövet
Placenta
Betegség
Choriocarcinoma
Áttétes hely
Agy
Szinonimák
  • BeWo
  • Be Wo
  • Be-Wo

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
BEWO (Cytion katalógusszám 300123)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0044

05Kifejeződés és fogékonyság

Izoenzimek
G6PD, B
Vírusérzékenység
Poliovírus 3, hólyagos szájgyulladás (Indiana)
Fordított transzkriptáz
Negatív
Termékek
Progeszteron, humán korionos szomatomammotropin (placenta laktogén), ösztrogén, ösztron, ösztriol, ösztradiol, keratin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12K médium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM nátrium-piruvát, w: 2,5 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820608a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 vetési sűrűség ajánlott.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Magzat