BEWO-celler

BeWo-celler, en cellelinje avledet fra malignt svangerskapskoriokarsinom i morkaken hos foster av hankjønn, har blitt en mye brukt in vitro-modell for å studere morkaken.

Celle-celle-fusjonen under syncytialiseringsfasen i den humane trofoblasten under utviklingen av morkaken er en av de mest betydningsfulle, men likevel minst forståtte hendelsene. Fordi det er vanskelig å studere denne prosessen i en placenta in vivo, brukes BeWo-celler som en cellekulturmodell for å simulere in vivo syncytialisering av den villøse trofoblasten i placenta.

Disse cellene har en epitel-lignende fenotype og er adherente. Subklonen b30 av BeWo-celler er spesielt nyttig for studier av næringsopptak og -transport på grunn av den tette veksten på permeable membraner.

CK 7 og E-cadherin er molekylære markører som uttrykkes av BeWo-celler. VE-cadherin finnes i BeWo-celler og forsterkes ved behandling med forskolin. Cellene uttrykker også keratin og er positive for G6PD, B-isoenzym. Karyotypen til BeWo-cellene er modaltall = 86, med et intervall på 71 til 178, og stamlinjetallet er hypotetraploid.

Karyotypen er relativt stabil innenfor stamlinjetallet. BeWo-celler skiller ut ulike hormoner, blant annet humant koriongonadotropin (hCG), humant korion somatomammotropin (placentalaktogen) og steroidhormoner som østron, østriol og østradiol.

Nivåene av β-hCG og østradiol som skilles ut av BeWo-celler er imidlertid lavere enn de som skilles ut av andre koriokarsinom-avledede cellelinjer, som JEG-3. Ved behandling med forskolin øker utskillelsen av β-hCG i BeWo-celler til et nivå som ligner det som er observert i de andre cellelinjene som stammer fra koriokarsinom. Videre øker behandling med forskolin også progesteronnivåene som skilles ut av BeWo-celler.

Oppsummert er BeWo-celler en mye brukt in vitro-modell for å studere placentautvikling og syncytialiseringsprosessen hos humane trofoblaster. De har en epitel-lignende fenotype, uttrykker ulike molekylære markører og skiller ut flere hormoner, blant annet hCG, placentalaktogen og steroidhormoner. Samlet sett er BeWo-celler et verdifullt verktøy for å undersøke de komplekse prosessene som er involvert i utviklingen av morkaken.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring