Células BEWO

Las células BeWo, una línea celular derivada del coriocarcinoma gestacional maligno de la placenta fetal masculina, se han convertido en un modelo in vitro ampliamente utilizado para estudiar la placenta.

La fusión célula-célula durante la fase de sincitialización del trofoblasto humano durante el desarrollo placentario es uno de los acontecimientos más significativos pero menos comprendidos. Debido a la dificultad de estudiar este proceso en una placenta in vivo, las células BeWo se utilizan como modelo de cultivo celular para simular la sincitialización in vivo del trofoblasto velloso placentario.

Estas células presentan un fenotipo de tipo epitelial y son adherentes. El subclon b30 de las células BeWo es especialmente útil para estudiar la captación y el transporte de nutrientes debido a su crecimiento denso sobre membranas permeables.

CK 7 y E-cadherina son marcadores moleculares que expresan las células BeWo. La VE-cadherina se encuentra en las células BeWo y aumenta con el tratamiento con forskolina. Las células también expresan queratina y son positivas para la isoenzima B de la G6PD. El cariotipo de las células BeWo es de número modal = 86, con un rango de 71 a 178, y el número de la línea madre es hipotetraploide.

El cariotipo es relativamente estable dentro del número de la línea madre. Las células BeWo segregan varias hormonas, como la gonadotropina coriónica humana (hCG), la somatomammotropina coriónica humana (lactógeno placentario) y hormonas esteroideas como estrona, estriol y estradiol.

Sin embargo, los niveles de β-hCG y estradiol segregados por las células BeWo son inferiores a los segregados por otras líneas celulares derivadas de coriocarcinoma, como la JEG-3. Tras el tratamiento con forskolina, la secreción de β-hCG en las células BeWo aumenta hasta un nivel similar al observado en las otras líneas celulares derivadas de coriocarcinoma. Además, el tratamiento con forskolina también aumenta los niveles de progesterona secretados por las células BeWo.

En resumen, las células BeWo son un modelo in vitro ampliamente utilizado para estudiar el desarrollo placentario y el proceso de sincitialización del trofoblasto humano. Presentan un fenotipo de tipo epitelial, expresan diversos marcadores moleculares y secretan múltiples hormonas, entre ellas hCG, lactógeno placentario y hormonas esteroideas. En conjunto, las células BeWo constituyen una valiosa herramienta para investigar los complejos procesos que intervienen en el desarrollo placentario.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía