Células BEWO

Las células BeWo, una línea celular derivada de un coriocarcinoma gestacional maligno de la placenta fetal masculina, se han convertido en un modelo in vitro ampliamente utilizado para el estudio de la placenta.

La fusión célula-célula que ocurre durante la fase de sincitialización del trofoblasto humano en el desarrollo placentario es uno de los eventos más significativos y, al mismo tiempo, menos comprendidos. Debido a la dificultad de estudiar este proceso en una placenta in vivo, las células BeWo se utilizan como modelo de cultivo celular para simular la sincitialización in vivo del trofoblasto vellositario placentario.

Estas células presentan un fenotipo de tipo epitelial y son adherentes. El subclon b30 de las células BeWo es particularmente útil para estudiar la captación y el transporte de nutrientes debido a su crecimiento denso sobre membranas permeables.

La CK 7 y la E-cadherina son marcadores moleculares que expresan las células BeWo. La VE-cadherina se encuentra en las células BeWo y su expresión aumenta tras el tratamiento con forskolina. Las células también expresan queratina y dan positivo para la isoenzima B de la G6PD. El cariotipo de las células BeWo tiene un número modal de 86, con un rango de 71 a 178, y el número de la línea madre es hipotetraploide.

El cariotipo es relativamente estable dentro del número de la línea madre. Las células BeWo secretan diversas hormonas, entre ellas la gonadotropina coriónica humana (hCG), la somatomamotropina coriónica humana (lactógeno placentario) y hormonas esteroides como la estrona, el estriol y el estradiol.

Sin embargo, los niveles de β-hCG y estradiol secretados por las células BeWo son más bajos que los secretados por otras líneas celulares derivadas del coriocarcinoma, como la JEG-3. Tras el tratamiento con forskolina, la secreción de β-hCG en las células BeWo aumenta hasta un nivel similar al observado en otras líneas celulares derivadas del coriocarcinoma. Además, el tratamiento con forskolina también aumenta los niveles de progesterona secretados por las células BeWo.

En resumen, las células BeWo son un modelo in vitro ampliamente utilizado para estudiar el desarrollo placentario y el proceso de sincitialización de los trofoblastos humanos. Presentan un fenotipo de tipo epitelial, expresan diversos marcadores moleculares y secretan múltiples hormonas, entre ellas la hCG, el lactógeno placentario y las hormonas esteroides. En general, las células BeWo son una herramienta valiosa para investigar los complejos procesos involucrados en el desarrollo placentario.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.