BEWO-kennot

BeWo-soluista, jotka ovat peräisin pahanlaatuisesta sikiön istukan malignista gestationaalisesta koriokarsinoomasta, on tullut laajalti käytetty in vitro -malli istukan tutkimiseen.

Solujen ja solujen fuusio ihmisen trofoblastien synkistymisvaiheessa istukan kehityksen aikana on yksi merkittävimmistä mutta vähiten ymmärretyistä tapahtumista. Koska tämän prosessin tutkiminen istukassa in vivo on vaikeaa, BeWo-soluja käytetään soluviljelymallina simuloimaan istukan kyläkuvun trofoblastin in vivo-synkyysiutumista.

Näillä soluilla on epiteelin kaltainen fenotyyppi ja ne ovat tarttuvia. BeWo-solujen b30-alaklooni on erityisen käyttökelpoinen ravinteiden ottamisen ja kuljettamisen tutkimiseen, koska se kasvaa tiheästi läpäisevillä kalvoilla.

CK 7 ja E-kadheriini ovat molekyylimarkkereita, joita BeWo-solut ilmentävät. VE-kadheriinia esiintyy BeWo-soluissa, ja se vahvistuu forskoliinikäsittelyssä. Solut ilmentävät myös keratiinia ja ovat positiivisia G6PD, B-isoentsyymille. BeWo-solujen karyotyyppi on modaaliluku = 86, vaihteluväli 71-178, ja kantaluku on hypotetraploidi.

Karyotyyppi on suhteellisen vakaa kantaluvun sisällä. BeWo-solut erittävät erilaisia hormoneja, kuten ihmisen koriongonadotropiinia (hCG), ihmisen korionisomatomammotropiinia (istukan laktogeeni) ja steroidihormoneja, kuten estronia, estriolia ja estradiolia.

BeWo-solujen erittämät β-hCG- ja estradiolipitoisuudet ovat kuitenkin alhaisemmat kuin muiden koriokarsinoomasta peräisin olevien solulinjojen, kuten JEG-3:n, erittämät. Forskoliinikäsittelyn jälkeen β-hCG:n eritys BeWo-soluissa lisääntyy samalle tasolle kuin muilla koriookarsinoomasta peräisin olevilla solulinjoilla. Lisäksi forskoliinihoito lisää myös BeWo-solujen erittämää progesteronitasoa.

Yhteenvetona voidaan todeta, että BeWo-solut ovat laajalti käytetty in vitro -malli istukan kehityksen ja ihmisen trofoblastien synkistymisprosessin tutkimiseen. Niillä on epiteelin kaltainen fenotyyppi, ne ilmentävät erilaisia molekyylimarkkereita ja erittävät useita hormoneja, mukaan lukien hCG, istukan laktogeeni ja steroidihormonit. Kaiken kaikkiaan BeWo-solut ovat arvokas väline istukan kehitykseen liittyvien monimutkaisten prosessien tutkimiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa