Tế bào BEWO

Tế bào BeWo, một dòng tế bào được phân lập từ u choriocarcinoma ác tính của nhau thai nam thai nhi, đã trở thành mô hình in vitro được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu nhau thai.

Quá trình hợp nhất tế bào trong giai đoạn syncytialization của tế bào trophoblast người trong quá trình phát triển nhau thai là một trong những sự kiện quan trọng nhất nhưng ít được hiểu rõ nhất. Do khó khăn trong việc nghiên cứu quá trình này trong nhau thai in vivo, các tế bào BeWo được sử dụng như một mô hình nuôi cấy tế bào để mô phỏng quá trình syncytialization in vivo của tế bào trophoblast nhung mao nhau thai.

Các tế bào này có biểu hiện kiểu hình biểu mô và có khả năng bám dính. Dòng con b30 của tế bào BeWo đặc biệt hữu ích cho việc nghiên cứu quá trình hấp thu và vận chuyển chất dinh dưỡng do khả năng phát triển dày đặc trên màng bán thấm.

CK 7 và E-cadherin là các dấu hiệu phân tử được biểu hiện bởi tế bào BeWo. VE-cadherin có mặt trong tế bào BeWo và được tăng cường sau khi xử lý với forskolin. Các tế bào này cũng biểu hiện keratin và dương tính với G6PD, isoenzyme B. Karyotype của tế bào BeWo có số lượng modal là 86, với phạm vi từ 71 đến 178, và số lượng dòng gốc là hypotetraploid.

Karyotype tương đối ổn định trong phạm vi số lượng dòng tế bào. Tế bào BeWo tiết ra các hormone khác nhau, bao gồm hormone gonadotropin của nhau thai người (hCG), hormone somatomammotropin của nhau thai người (lactogen nhau thai) và các hormone steroid như estrone, estriol và estradiol.

Tuy nhiên, nồng độ β-hCG và estradiol do tế bào BeWo tiết ra thấp hơn so với các dòng tế bào choriocarcinoma khác như JEG-3. Sau khi điều trị bằng Forskolin, nồng độ β-hCG trong tế bào BeWo tăng lên mức tương tự như ở các dòng tế bào choriocarcinoma khác. Hơn nữa, việc điều trị bằng Forskolin cũng làm tăng nồng độ progesterone được tiết ra bởi các tế bào BeWo.

Tóm lại, các tế bào BeWo là mô hình in vitro được sử dụng rộng rãi để nghiên cứu sự phát triển của nhau thai và quá trình syncytialization của tế bào trophoblast người. Chúng có biểu hiện kiểu hình biểu mô, biểu hiện các dấu hiệu phân tử khác nhau và tiết ra nhiều hormone, bao gồm hCG, lactogen nhau thai và hormone steroid. Nhìn chung, các tế bào BeWo là công cụ quý giá để nghiên cứu các quá trình phức tạp liên quan đến sự phát triển của nhau thai.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.