BEWO rakud

BeWo rakud, mis on loote meessoost platsenta pahaloomulisest gestatsioonikoriokartsinoomist saadud rakuliin, on saanud laialdaselt kasutatavaks in vitro mudeliks platsenta uurimiseks.

Raku ja rakkude ühinemine inimese trofoblastide süntsiatsioonifaasis platsenta arengu ajal on üks olulisemaid, kuid samas kõige vähem mõistetud sündmusi. Kuna seda protsessi on raske uurida platsentas in vivo, kasutatakse BeWo rakke rakukultuurimudelina, et simuleerida platsenta villoosse trofoblasti in vivo süntsiatsioone.

Need rakud omavad epiteelilaadset fenotüüpi ja on adherentsed. BeWo rakkude b30 subkloon on eriti kasulik toitainete omastamise ja transpordi uurimiseks, kuna ta kasvab tihedalt läbilaskvatel membraanidel.

CK 7 ja E-kadheriin on molekulaarsed markerid, mida BeWo rakud ekspresseerivad. VE-kadheriini leidub BeWo rakkudes ja see suureneb ravimisel forskoliiniga. Rakud ekspresseerivad ka keratiini ja on positiivsed G6PD, B isoensüümi suhtes. BeWo rakkude karyotüüp on modaalne arv = 86, vahemikus 71-178, ja tüvirida on hüpotetraploidne.

Karüotüüp on suhteliselt stabiilne tüviridaarvu piires. BeWo rakud eritavad erinevaid hormoone, sealhulgas inimese kooriongonadotropiini (hCG), inimese koorionsomatomammotropiini (platsenta laktogeen) ja steroidhormoone nagu östroon, östriool ja östradiool.

BeWo rakkude poolt sekreteeritud β-hCG ja östradiooli tase on siiski madalam kui teiste koorikartsinoomist saadud rakuliinide, näiteks JEG-3, poolt sekreteeritavad tasemed. Forskoliinravi korral suureneb β-hCG sekretsioon BeWo rakkudes sarnasele tasemele, mis on täheldatud teiste koorikartsinoomist saadud rakuliinide puhul. Lisaks suurendab Forskolin-ravi ka BeWo rakkude poolt eritatava progesterooni taset.

Kokkuvõttes on BeWo rakud laialdaselt kasutatav in vitro mudel platsenta arengu ja inimese trofoblastide süntsiatsiooniprotsessi uurimiseks. Neil on epiteelilaadne fenotüüp, nad ekspresseerivad erinevaid molekulaarseid markereid ja eritavad mitmeid hormoone, sealhulgas hCG, platsenta laktogeeni ja steroidhormoone. Üldiselt on BeWo rakud väärtuslik vahend platsenta arenguga seotud keeruliste protsesside uurimiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest