BEWO šūnas

BeWo šūnas, šūnu līnija, kas iegūta no ļaundabīgas gesta horiokarcinomas vīriešu augļa placentā, ir kļuvušas par plaši izmantotu in vitro modeli placentas izpētei.

Šūnu un šūnu saplūšana cilvēka trofoblasta sincifikācijas fāzē placentas attīstības laikā ir viens no nozīmīgākajiem, bet vismazāk izpētītajiem notikumiem. Sakarā ar grūtībām pētīt šo procesu placentā in vivo, BeWo šūnas tiek izmantotas kā šūnu kultūru modelis, lai simulētu placentas dzemdes trofoblasta sincifikāciju in vivo.

Šīm šūnām piemīt epitēlijam līdzīgs fenotips, un tās ir adherentas. BeWo šūnu b30 subklons ir īpaši noderīgs barības vielu uzņemšanas un transportēšanas izpētei, jo tas blīvi aug uz caurlaidīgām membrānām.

CK 7 un E-kadherīns ir molekulārie marķieri, ko izsaka BeWo šūnas. VE-kadherīns ir sastopams BeWo šūnās, un tā klātbūtne pastiprinās pēc apstrādes ar forskolīnu. Šūnas arī ekspresē keratīnu un ir pozitīvas G6PD, B izoenzīma noteikšanai. BeWo šūnu kariotipam ir modālais skaits = 86, ar diapazonu no 71 līdz 178, un cilmes līnijas numurs ir hipotetraploīds.

Kariatotips ir relatīvi stabils cilmes līnijas skaita robežās. BeWo šūnas izdala dažādus hormonus, tostarp cilvēka horiongonadotropīnu (hCG), cilvēka horionsomatomammotropīnu (placentas laktogēnu) un steroīdhormonus estronu, estriolu un estradiolu.

Tomēr BeWo šūnu izdalītais β-hCG un estradiola līmenis ir zemāks nekā citās no horiokarcinomas atvasinātās šūnu līnijās, piemēram, JEG-3, izdalītais līmenis. Pēc apstrādes ar forskolīnu BeWo šūnu β-hCG sekrēcija palielinās līdz līmenim, kas ir līdzīgs līmenim, kāds novērots citās no horiokarcinomas atvasinātajās šūnu līnijās. Turklāt apstrāde ar forskolīnu palielina arī progesterona līmeni, ko izdala BeWo šūnas.

Kopumā BeWo šūnas ir plaši izmantots in vitro modelis placentas attīstības un cilvēka trofoblasta sincifikācijas procesa izpētei. Tām piemīt epitēlijam līdzīgs fenotips, tās ekspresē dažādus molekulāros marķierus un izdala vairākus hormonus, tostarp hCG, placentāro laktogēnu un steroīdu hormonus. Kopumā BeWo šūnas ir vērtīgs instruments, lai pētītu sarežģītos procesus, kas saistīti ar placentas attīstību.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu