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CHO-NECTIN4
Tissu
Ovaire
Maladie
Ovaires de hamster chinois, non néoplasiques ; modifiés génétiquement pour l'expression de NECTIN4 (PVRL4) à la surface

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CHO-NECTIN4

Cell line · Référence du produit 305984

Avertissement : les prix indiqués pour les lignées cellulaires s'adressent exclusivement aux clients du secteur universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, les prix...

€1,900.00hors taxes et frais de port
Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

Avertissement : les prix indiqués pour les lignées cellulaires s'adressent exclusivement aux clients du secteur universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d'environ 6 250 €. Si vous représentez une entité commerciale ou si vous ne savez pas à quelle catégorie vous appartenez, veuillez nous contacter.


Les cellules CHO-NECTIN4 constituent une lignée cellulaire stable recombinante dérivée d’ovaires de hamster chinois (CHO), conçue pour exprimer la nectine-4 humaine (également connue sous le nom de PVRL4 ou protéine 4 apparentée au récepteur du poliovirus), une protéine transmembranaire de type I appartenant à la famille des nectines, des molécules d’adhésion cellulaire. La Nectin-4 est un antigène associé aux tumeurs bien établi, surexprimé dans de nombreux types de tumeurs solides, notamment le carcinome urothélial de la vessie, le cancer du sein, le cancer du poumon non à petites cellules et le cancer du pancréas, ce qui en fait une cible cliniquement validée pour les conjugués anticorps-médicaments (ADC) et d’autres immunothérapies ciblées. L’ADC enfortumab vedotin, qui cible la Nectine-4, est approuvé pour le traitement du carcinome urothélial, ce qui souligne la pertinence thérapeutique de cet antigène.

Les cellules CHO-NECTIN4 sont largement utilisées pour le développement et la caractérisation d’anticorps dirigés contre la Nectine-4, d’ADC, d’anticorps bispécifiques et de thérapies par cellules CAR-T. Ce système d’expression recombinant stable permet de réaliser des tests de liaison quantitatifs, des évaluations de cytotoxicité ADCC/CDC, des études d’internalisation des récepteurs et un criblage à haut débit d’anticorps par cytométrie en flux. La lignée CHO présente une faible expression endogène de la plupart des antigènes de surface humains, garantissant ainsi que les signaux observés sont attribuables au transgène Nectin-4 exprimé de manière stable. Cette lignée cellulaire est validée pour une utilisation dans les processus de découverte de médicaments, la sélection de candidats en phase préclinique et les études mécanistiques sur la biologie du récepteur Nectin-4.

Tissu
Ovaire
Maladie
Ovaires de hamster chinois, non néoplasiques ; modifiés génétiquement pour l'expression de NECTIN4 (PVRL4) à la surface
Applications
Criblage d'anticorps ; développement d'ADC ; développement de traitements ciblant la NECTIN4 ; recherche sur le cancer urothélial et le cancer du sein ; cytométrie en flux

02Classification

Organisme
Hamster chinois
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adhérent et en suspension
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Type de cellule
Cellules épithéliales
Temps de doublement
environ 14 à 16 heures

04Identifiants

Référence
CHO-NECTIN4 (référence Cytion 305984)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05Expression et sensibilité

Antigènes de surface
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Manipulation et culture

Milieu de culture

Pour les cultures adhérentes : DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Pyruvate de sodium, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)

Pour les cultures en suspension : Milieu de croissance CHO A (de InSCREENeX ; numéro de catalogue de InSCREENeX INS-ME-1039)

Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Pour les cultures adhérentes : Compléter le milieu avec 5% de FBS. Ajouter de la généticine (G418-Sulfat) pour obtenir une concentration finale de 0,5 mg/ml.
Réactif de dissociation
Pour les cultures adhérentes : Trypsine-EDTA
Repiquage
Pour la culture de routine de cellules adhérentes : Aspirer l'ancien milieu de culture des cellules adhérentes et les laver avec du PBS pour éliminer tout milieu restant. Après avoir aspiré le PBS, ajouter le volume approprié de solution de Trypsine/EDTA en fonction de la taille du récipient de culture (par exemple, 1 ml pour un flacon T25, 3 ml pour un flacon T75) et incuber à température ambiante ou à 37°C pendant 5-10 minutes, ou jusqu'à ce que les cellules se détachent. Surveiller le détachement au microscope et tapoter doucement le récipient si nécessaire pour libérer les cellules. Une fois les cellules détachées, ajouter du milieu complet pour inactiver la trypsine/EDTA, remettre doucement les cellules en suspension et transférer une aliquote de la suspension cellulaire dans un nouveau récipient de culture contenant du milieu frais. Placer le récipient dans un incubateur réglé à 37°C avec 5% deCO2, et changer le milieu tous les 2-3 jours.
Rapport de fractionnement
1 à 5
Densité de semis
2 à 5 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel

Après décongélation, diviser les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer (pour les cultures adhérentes) pendant au moins 24 heures.

Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Adulte