Перейти до вмісту
CHO-NECTIN4
Тканина
Яєчник
Хвороба
Яєчник китайського хом’яка, непухлинний; генетично модифікований для поверхневої експресії NECTIN4 (PVRL4)

Документи

CHO-NECTIN4

Cell line · Номер товару 305984

Застереження: Ціни, вказані для клітинних ліній, діють виключно для клієнтів з академічного сектору та некомерційних організацій. Для комерційних організацій ціни...

€1,900.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

Застереження: Ціни, вказані для клітинних ліній, призначені виключно для клієнтів з академічного сектору та некомерційних організацій. Для комерційних організацій ціна становить приблизно 6 250 євро. Якщо ви представляєте комерційну організацію або не впевнені, до якої категорії належите, будь ласка, зв’яжіться з нами.


Клітини CHO-NECTIN4 — це стабільна рекомбінантна клітинна лінія яєчників китайського хом’яка (CHO), модифікована для експресії людського нектину-4 (також відомого як PVRL4 або білок 4, пов’язаний з рецептором поліовірусу) — трансмембранного білка типу I, що належить до родини нектинів — молекул клітинної адгезії. Nectin-4 — це добре відомий пухлинний антиген, який надмірно експресується в багатьох типах солідних пухлин, зокрема в уротеліальній карциномі сечового міхура, раку молочної залози, недрібноклітинному раку легенів та раку підшлункової залози, що робить його клінічно підтвердженою мішенню для антитіло-лікарських кон’югатів (ADC) та інших цільових імунотерапевтичних засобів. АДК енфортумаб ведотин, що націлений на нектин-4, затверджено для лікування уротеліальної карциноми, що підкреслює терапевтичну значущість цього антигену.

Клітини CHO-NECTIN4 широко використовуються для розробки та характеристики антитіл, спрямованих проти Nectin-4, АДК, біспецифічних антитіл та терапій на основі CAR-T-клітин. Стабільна рекомбінантна система експресії підтримує проведення кількісних аналізів зв’язування, оцінку цитотоксичності методами ADCC/CDC, дослідження інтерналізації рецепторів та високопродуктивний скринінг антитіл методом проточної цитометрії. Клітинна лінія на основі CHO характеризується низьким рівнем ендогенної експресії більшості людських поверхневих антигенів, що гарантує, що спостережувані сигнали пов’язані саме зі стабільно експресованим трансгеном Nectin-4. Ця клітинна лінія валідована для використання у процесах розробки лікарських засобів, доклінічного відбору кандидатів та механістичних досліджень біології рецептора Nectin-4.

Тканина
Яєчник
Хвороба
Яєчник китайського хом’яка, непухлинний; генетично модифікований для поверхневої експресії NECTIN4 (PVRL4)
Застосування
Скринінг антитіл; розробка антитіл-ліків (ADC); розробка терапії, спрямованої на NECTIN4; дослідження раку сечового міхура та молочної залози; проточна цитометрія

02Класифікація

Організм
Китайський хом'як
Секс
Жінка
Характеристики росту
Адгезійний та суспензійний
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальні клітини
Час подвоєння
приблизно 14–16 годин

04Ідентифікатори

Посилання
CHO-NECTIN4 (номер у каталозі Cytion 305984)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10029
Целозавр
CVCL_A8W9

05Експресія та сприйнятливість

Поверхневі антигени
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище

Для адитивних культур: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)

Для суспензійних культур: Поживне середовище CHO A (від InSCREENeX; номер за каталогом InSCREENeX INS-ME-1039)

Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Для адгезивних культур: Додайте до середовища 5% FBS. Додайте Geneticin (G418-Sulfat) для досягнення кінцевої концентрації 0,5 мг/мл.
Реагент для дисоціації
Для адитивних культур: Трипсин-ЕДТА
Пересадка в нове середовище
Для рутинного культивування адгезивних клітин: Аспіруйте старе культуральне середовище з адгезивних клітин і промийте їх PBS, щоб видалити залишки середовища. Після аспірації PBS додайте відповідний об'єм розчину трипсину/ЕДТА залежно від розміру культуральної посудини (наприклад, 1 мл для колби T25, 3 мл для колби T75) та інкубуйте при кімнатній температурі або 37°C протягом 5-10 хвилин, або поки клітини не відокремляться. Спостерігайте за відшаруванням під мікроскопом і, якщо необхідно, обережно постукайте по посудині, щоб звільнити клітини. Після відокремлення додайте повне середовище для інактивації трипсину/ЕДТА, обережно ресуспендуйте клітини і перенесіть аліквоту клітинної суспензії в нову культуральну посудину зі свіжим середовищем. Помістіть посудину в інкубатор, налаштований на 37°C з 5% CO2, і міняйте середовище кожні 2-3 дні.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 5
Щільність висіву
Від 2 до 5 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги

Після розморожування розділіть клітини у співвідношенні 1:2 - 1:3 у колбах Т25 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування і склеїтися (для адгезивних культур) протягом щонайменше 24 годин.

Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Дорослий

Вам також може знадобитися