
- Weefsel
- Eierstok
- Ziekte
- Eierstokcellen van de Chinese hamster, niet-neoplastisch; genetisch gemodificeerd voor oppervlakte-expressie van NECTIN4 (PVRL4)
Documenten
CHO-NECTIN4
Cell line · Productnummer 305984
Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische klanten en klanten zonder winstoogmerk. Voor commerciële partijen gelden de pri...
Maatwerk / Aanbevelingen
- CHO-NECTIN4Cell line€1,900.00
01Algemene informatie
- Beschrijving
Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische klanten en klanten zonder winstoogmerk. Voor commerciële partijen bedraagt de prijs ongeveer € 6.250. Als u een commerciële partij vertegenwoordigt of niet zeker weet tot welke categorie u behoort, neem dan contact met ons op.
CHO-NECTIN4-cellen zijn een stabiele recombinante Chinese hamster-ovarium (CHO)-cellijn die is gemanipuleerd om menselijk Nectin-4 (ook bekend als PVRL4 of Poliovirus receptor-related protein 4) tot expressie te brengen, een type I-transmembraaneiwit dat behoort tot de nectinefamilie van celadhesiemoleculen. Nectin-4 is een algemeen erkend tumor-geassocieerd antigeen dat in meerdere soorten solide tumoren tot overexpressie komt, waaronder urotheelcarcinoom van de blaas, borstkanker, niet-kleincellige longkanker en alvleesklierkanker, waardoor het een klinisch gevalideerd doelwit is voor antilichaam-geneesmiddelconjugaten (ADC’s) en andere gerichte immuuntherapieën. Het ADC enfortumab vedotin, dat zich richt op Nectin-4, is goedgekeurd voor de behandeling van urotheelcarcinoom, wat het therapeutische belang van dit antigeen onderstreept.
CHO-NECTIN4-cellen worden op grote schaal gebruikt voor de ontwikkeling en karakterisering van tegen Nectin-4 gerichte antilichamen, ADC’s, bispecifieke antilichamen en CAR-T-celtherapieën. Het stabiele recombinante expressiesysteem ondersteunt kwantitatieve bindingsassays, ADCC/CDC-cytotoxiciteitsevaluaties, onderzoeken naar receptorinternalisatie en high-throughput-antilichaamscreening door middel van flowcytometrie. De CHO-achtergrond zorgt voor een lage endogene expressie van de meeste menselijke oppervlakte-antigenen, waardoor wordt gewaarborgd dat waargenomen signalen toe te schrijven zijn aan het stabiel tot expressie gebrachte Nectin-4-transgen. Deze cellijn is gevalideerd voor gebruik in werkprocessen voor geneesmiddelenontwikkeling, preklinische kandidaatselectie en mechanistische studies naar de biologie van de Nectin-4-receptor.
- Weefsel
- Eierstok
- Ziekte
- Eierstokcellen van de Chinese hamster, niet-neoplastisch; genetisch gemodificeerd voor oppervlakte-expressie van NECTIN4 (PVRL4)
- Toepassingen
- Antilichaamscreening; ontwikkeling van ADC’s; ontwikkeling van therapieën gericht op NECTIN4; onderzoek naar urotheelkanker en borstkanker; flowcytometrie
02Classificatie
- Organisme
- Chinese hamster
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Adhesie en suspensie
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
- Celtype
- Epitheelcellen
- Verdubbelingstijd
- ongeveer 14-16 uur
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- CHO-NECTIN4 (Cytion-catalogusnummer 305984)
- NCBI-belastingnummer
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8W9
05Expressie en vatbaarheid
- Oppervlakte-antigenen
- NECTIN4 (PVRL4/CD112R)
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
Voor adherente culturen: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Voor suspensieculturen: CHO Growth Medium A (van InSCREENeX; InSCREENeX catalogusnummer INS-ME-1039)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Voor adherente culturen: Vul het medium aan met 5% FBS. Geneticine (G418-Sulfat) toevoegen tot een eindconcentratie van 0,5 mg/ml.
- Dissociatiereagens
- Voor adherente culturen: Trypsine-EDTA
- Heruitplanten
- Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume trypsine/EDTA-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer bij kamertemperatuur of 37 °C gedurende 5-10 minuten, of totdat de cellen loskomen. Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om de trypsine/EDTA te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het kweekvat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 5
- Zaaidichtheid
- 2 tot 5 x 104 cellen/cm2
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Herstel na ontdooiing
Splits de cellen na het ontdooien in een verhouding van 1:2 tot 1:3 in T25-flesjes en laat de cellen minstens 24 uur bijkomen van het vriesproces en zich hechten (voor adherente culturen).
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- Volwassen
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Disclaimer
- Onze cellen worden uitsluitend geleverd voor in vitro laboratoriumonderzoek en zijn niet bedoeld voor klinisch of diagnostisch gebruik, noch mogen ze worden toegediend aan mensen of worden gebruikt voor veterinaire doeleinden. Gebruikers moeten zich houden aan alle toepasselijke richtlijnen en voorschriften voor het hanteren en gebruiken van deze cellen in een onderzoeksomgeving.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er gelden overeenkomsten met derden
- Ja


.jpg)