Ga naar de inhoud
CHO-NECTIN4
Weefsel
Eierstok
Ziekte
Eierstokcellen van de Chinese hamster, niet-neoplastisch; genetisch gemodificeerd voor oppervlakte-expressie van NECTIN4 (PVRL4)

Documenten

CHO-NECTIN4

Cell line · Productnummer 305984

Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische klanten en klanten zonder winstoogmerk. Voor commerciële partijen gelden de pri...

€1,900.00excl. btw en verzendkosten
Op bestelling gemaakt
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Disclaimer: De weergegeven prijzen voor cellijnen gelden uitsluitend voor academische klanten en klanten zonder winstoogmerk. Voor commerciële partijen bedraagt de prijs ongeveer € 6.250. Als u een commerciële partij vertegenwoordigt of niet zeker weet tot welke categorie u behoort, neem dan contact met ons op.


CHO-NECTIN4-cellen zijn een stabiele recombinante Chinese hamster-ovarium (CHO)-cellijn die is gemanipuleerd om menselijk Nectin-4 (ook bekend als PVRL4 of Poliovirus receptor-related protein 4) tot expressie te brengen, een type I-transmembraaneiwit dat behoort tot de nectinefamilie van celadhesiemoleculen. Nectin-4 is een algemeen erkend tumor-geassocieerd antigeen dat in meerdere soorten solide tumoren tot overexpressie komt, waaronder urotheelcarcinoom van de blaas, borstkanker, niet-kleincellige longkanker en alvleesklierkanker, waardoor het een klinisch gevalideerd doelwit is voor antilichaam-geneesmiddelconjugaten (ADC’s) en andere gerichte immuuntherapieën. Het ADC enfortumab vedotin, dat zich richt op Nectin-4, is goedgekeurd voor de behandeling van urotheelcarcinoom, wat het therapeutische belang van dit antigeen onderstreept.

CHO-NECTIN4-cellen worden op grote schaal gebruikt voor de ontwikkeling en karakterisering van tegen Nectin-4 gerichte antilichamen, ADC’s, bispecifieke antilichamen en CAR-T-celtherapieën. Het stabiele recombinante expressiesysteem ondersteunt kwantitatieve bindingsassays, ADCC/CDC-cytotoxiciteitsevaluaties, onderzoeken naar receptorinternalisatie en high-throughput-antilichaamscreening door middel van flowcytometrie. De CHO-achtergrond zorgt voor een lage endogene expressie van de meeste menselijke oppervlakte-antigenen, waardoor wordt gewaarborgd dat waargenomen signalen toe te schrijven zijn aan het stabiel tot expressie gebrachte Nectin-4-transgen. Deze cellijn is gevalideerd voor gebruik in werkprocessen voor geneesmiddelenontwikkeling, preklinische kandidaatselectie en mechanistische studies naar de biologie van de Nectin-4-receptor.

Weefsel
Eierstok
Ziekte
Eierstokcellen van de Chinese hamster, niet-neoplastisch; genetisch gemodificeerd voor oppervlakte-expressie van NECTIN4 (PVRL4)
Toepassingen
Antilichaamscreening; ontwikkeling van ADC’s; ontwikkeling van therapieën gericht op NECTIN4; onderzoek naar urotheelkanker en borstkanker; flowcytometrie

02Classificatie

Organisme
Chinese hamster
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Adhesie en suspensie
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen
Verdubbelingstijd
ongeveer 14-16 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
CHO-NECTIN4 (Cytion-catalogusnummer 305984)
NCBI-belastingnummer
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05Expressie en vatbaarheid

Oppervlakte-antigenen
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium

Voor adherente culturen: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)

Voor suspensieculturen: CHO Growth Medium A (van InSCREENeX; InSCREENeX catalogusnummer INS-ME-1039)

Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Voor adherente culturen: Vul het medium aan met 5% FBS. Geneticine (G418-Sulfat) toevoegen tot een eindconcentratie van 0,5 mg/ml.
Dissociatiereagens
Voor adherente culturen: Trypsine-EDTA
Heruitplanten
Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume trypsine/EDTA-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer bij kamertemperatuur of 37 °C gedurende 5-10 minuten, of totdat de cellen loskomen. Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om de trypsine/EDTA te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het kweekvat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
2 tot 5 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing

Splits de cellen na het ontdooien in een verhouding van 1:2 tot 1:3 in T25-flesjes en laat de cellen minstens 24 uur bijkomen van het vriesproces en zich hechten (voor adherente culturen).

Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Volwassen