Премини към съдържанието
CHO-NECTIN4
Тъкан
Яйчник
Заболяване
Яйчници на китайски хамстер, ненеопластични; генетично модифицирани за повърхностна експресия на NECTIN4 (PVRL4)

Документи

CHO-NECTIN4

Cell line · Номер на продукта 305984

Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цените...

€1,900.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цената е приблизително 6 250 евро. Ако представлявате търговски субект или не сте сигурни в коя категория попадате, моля, свържете се с нас.


Клетките CHO-NECTIN4 представляват стабилна рекомбинантна клетъчна линия от яйчници на китайски хамстер (CHO), модифицирана да експресира човешкия Nectin-4 (известен също като PVRL4 или протеин 4, свързан с рецептора на полиовируса), трансмембранен протеин от тип I, принадлежащ към семейството на нектините – молекули за клетъчна адхезия. Nectin-4 е добре установен туморен антиген, който се свръхекспресира в множество видове солидни тумори, включително уротелиален карцином на пикочния мехур, рак на гърдата, недребноклетъчен белодробен карцином и рак на панкреаса, което го превръща в клинично валидирана мишена за антитяло-лекарствени конюгати (ADC) и други целеви имунотерапевтични средства. ADC-то енфортумаб ведотин, което е насочено към нектин-4, е одобрено за лечение на уротелиален карцином, което подчертава терапевтичната значимост на този антиген.

Клетките CHO-NECTIN4 се използват широко за разработване и характеризиране на антитела, насочени срещу Nectin-4, ADC, биспецифични антитела и CAR-T-клетъчни терапии. Стабилната рекомбинантна експресионна система поддържа количествени тестове за свързване, оценки на цитотоксичността чрез ADCC/CDC, изследвания на интернализацията на рецепторите и скрининг на антитела с висока производителност чрез проточна цитометрия. CHO-базата осигурява ниска ендогенна експресия на повечето човешки повърхностни антигени, което гарантира, че наблюдаваните сигнали се дължат на стабилно експресирания трансген Nectin-4. Тази клетъчна линия е валидирана за използване в работни процеси по откриване на лекарства, предклиничен подбор на кандидати и механистични изследвания на биологията на рецептора Nectin-4.

Тъкан
Яйчник
Заболяване
Яйчници на китайски хамстер, ненеопластични; генетично модифицирани за повърхностна експресия на NECTIN4 (PVRL4)
Приложения
Скрининг за антитела; разработване на ADC; разработване на терапия, насочена към NECTIN4; изследвания в областта на уротелиалния рак и рака на гърдата; проточна цитометрия

02Класификация

Организъм
Китайски хамстер
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Адхезивен и суспензионен
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Време за удвояване
около 14–16 часа

04Идентификатори

Източник
CHO-NECTIN4 (каталожен номер на Cytion 305984)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10029
Целозавър
CVCL_A8W9

05Проява и предразположеност

Повърхностни антигени
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда

За адхезивни култури: DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)

За суспензионни култури: CHO Growth Medium A (от InSCREENeX; каталожен номер INS-ME-1039 на InSCREENeX)

Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
За адхезивни култури: Допълнете средата с 5% FBS. Добавете Geneticin (G418-Sulfat), за да достигнете крайна концентрация от 0,5 mg/ml.
Реагент за дисоциация
За адхезивни култури: Трипсин-EDTA
Пресаждане
За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C за 5-10 минути или докато клетките се отделят. Наблюдавайте отделянето под микроскоп и ако е необходимо, леко потупайте съда, за да освободите клетките. След отделянето им добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
Коефициент на разделяне
от 1 до 5
Плътност на засяването
2 до 5 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване

След размразяването разделете клетките в съотношение 1:2 до 1:3 в колби Т25 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да залепнат (за залепнали култури) за най-малко 24 часа.

Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Възрастни

Може да ви е необходимо също