الانتقال إلى المحتوى
CHO-NECTIN4
الأنسجة
المبيض
المرض
مبيض الهامستر الصيني، غير الورمي؛ مُعدَّل وراثيًّا للتعبير السطحي لجين NECTIN4 (PVRL4)

المستندات

CHO-NECTIN4

Cell line · رقم المنتج 305984

إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة للخطوط الخلوية مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الهادفين للربح. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فإن الأسعار...

€1,900.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
1

01معلومات عامة

الوصف

إخلاء المسؤولية: الأسعار المعروضة لخطوط الخلايا مخصصة حصريًّا للعملاء الأكاديميين أو غير الهادفين للربح. أما بالنسبة للكيانات التجارية، فيبلغ السعر حوالي 6,250 يورو. إذا كنت تمثل كيانًا تجاريًّا أو لم تكن متأكدًا من الفئة التي تنطبق عليك، فيُرجى الاتصال بنا.


خلايا CHO-NECTIN4 هي سلالة خلوية مستقرة مُعاد تجميعها من مبيض الهامستر الصيني (CHO) ومُصممة هندسيًا للتعبير عن بروتين Nectin-4 البشري (المعروف أيضًا باسم PVRL4 أو البروتين 4 المرتبط بمستقبلات فيروس شلل الأطفال)، وهو بروتين عبر الغشاء من النوع الأول ينتمي إلى عائلة نكتين من جزيئات الالتصاق الخلوي. يُعد Nectin-4 مستضدًا مرتبطًا بالأورام معروفًا جيدًا، ويتم التعبير عنه بشكل مفرط في أنواع متعددة من الأورام الصلبة، بما في ذلك سرطان المثانة الظهاري، وسرطان الثدي، وسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة، وسرطان البنكرياس، مما يجعله هدفًا مُثبتًا سريريًّا لمركبات الأجسام المضادة والأدوية (ADCs) والعلاجات المناعية الموجهة الأخرى. وقد تمت الموافقة على مستحضر ADC «إنفورتوماب فيدوتين»، الذي يستهدف نكتين-4، لعلاج سرطان الظهارة البولية، مما يؤكد الأهمية العلاجية لهذا المستضد.

تُستخدم خلايا CHO-NECTIN4 على نطاق واسع لتطوير وتوصيف الأجسام المضادة الموجهة نحو Nectin-4، ومركبات الأجسام المضادة المرتبطة بالأدوية (ADCs)، والأجسام المضادة ثنائية النوعية، وعلاجات الخلايا التائية المُعدلة جينياً (CAR-T). يدعم نظام التعبير المؤتلف المستقر اختبارات الارتباط الكمية، وتقييمات السمية الخلوية ADCC/CDC، ودراسات استيعاب المستقبلات، وفحص الأجسام المضادة عالي الإنتاجية باستخدام قياس التدفق الخلوي. توفر الخلفية الخلوية لخلايا CHO مستوى منخفضًا من التعبير الداخلي لمعظم المستضدات السطحية البشرية، مما يضمن أن الإشارات الملاحظة تعزى إلى الجين المُستَنسَخ Nectin-4 المُعبَّر عنه بشكل مستقر. وقد تم التحقق من صلاحية هذا الخط الخلوي للاستخدام في سير عمل اكتشاف الأدوية، واختيار المرشحين في المرحلة ما قبل السريرية، والدراسات الآلية لبيولوجيا مستقبلات Nectin-4.

الأنسجة
المبيض
المرض
مبيض الهامستر الصيني، غير الورمي؛ مُعدَّل وراثيًّا للتعبير السطحي لجين NECTIN4 (PVRL4)
التطبيقات
فحص الأجسام المضادة؛ تطوير الجسيمات المركبة بالأجسام المضادة (ADC)؛ تطوير العلاج الموجه لـ NECTIN4؛ أبحاث سرطان الظهارة البولية وسرطان الثدي؛ قياس الخلايا بالتدفق

02التصنيف

كائن حي
الهامستر الصيني
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التثبيت والتعليق
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الخلايا الظهارية
زمن المضاعفة
حوالي 14-16 ساعة

04المعرّفات

المرجع
CHO-NECTIN4 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305984)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10029
سيلوصور
CVCL_A8W9

05التعبير والقابلية للإصابة

المستضدات السطحية
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع

للمزارع الملتصقة: DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)

للمزارع المعلقة وسط نمو CHO A (من InSCREENeX؛ رقم كتالوج InSCREENeX INS-ME-1039)

بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
للمزارع الملتصقة: إضافة 5٪ FBS إلى الوسط. أضف الجينيتين (G418-سلفات) للحصول على تركيز نهائي قدره 0.5 ملغم/ملل.
كاشف التفكك
للمزارع الملتصقة: التربسين-إدتا
إعادة الاستنبات
لمزرعة الخلايا الملتصقة الروتينية: اشفط وسط المزرعة القديم من الخلايا الملتصقة، واغسلها بمحلول PBS لإزالة أي وسط متبقي. بعد شفط PBS، أضف الكمية المناسبة من محلول التربسين/EDTA بناءً على حجم وعاء المزرعة (على سبيل المثال، 1 مل لقارورة T25، و3 مل لقارورة T75) واحتضانها في درجة حرارة الغرفة أو 37 درجة مئوية لمدة 5-10 دقائق، أو حتى تنفصل الخلايا. راقب الانفصال تحت المجهر، واضغط برفق على الوعاء إذا لزم الأمر لتحرير الخلايا. بمجرد الانفصال، أضف وسطاً كاملاً لتعطيل التريبسين/إيدتا، وأعد ترسيب الخلايا برفق وانقل كمية قليلة من معلق الخلايا إلى وعاء مزرعة جديد يحتوي على وسط جديد. ضع الوعاء في حاضنة مضبوطة على 37 درجة مئوية مع 5% من ثاني أكسيد الكربون، وقم بتغيير الوسط كل 2-3 أيام.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
2 إلى 5 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد

بعد الذوبان، قم بتقسيم الخلايا بنسبة 1:2 إلى 1:3 في قوارير T25 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق (للمزارع الملتصقة) لمدة 24 ساعة على الأقل.

إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
للبالغين

قد تحتاج أيضًا إلى