Přejít na obsah
CHO-NECTIN4
Tkáň
Ovarium
Nemoc
Vaječníky čínského křečka, nenádorové; geneticky modifikované pro povrchovou expresi NECTIN4 (PVRL4)

Dokumenty

CHO-NECTIN4

Cell line · Číslo výrobku 305984

Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty platí ceny...

€1,900.00bez DPH a poštovného
Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

Upozornění: Ceny uvedené u buněčných linií platí výhradně pro akademické a neziskové zákazníky. Pro komerční subjekty činí cena přibližně 6 250 €. Pokud zastupujete komerční subjekt nebo si nejste jisti, do které kategorie spadáte, kontaktujte nás prosím.


Buňky CHO-NECTIN4 představují stabilní rekombinantní buněčnou linii z vaječníků čínského křečka (CHO), která byla geneticky upravena tak, aby exprimovala lidský Nectin-4 (známý také jako PVRL4 nebo protein 4 příbuzný receptoru polioviru), transmembránový protein typu I patřící do rodiny nectinů, což jsou molekuly buněčné adheze. Nectin-4 je dobře známý nádorový antigen, který je nadměrně exprimován v mnoha typech solidních nádorů, včetně uroteliálního karcinomu močového měchýře, rakoviny prsu, nemalobuněčného karcinomu plic a rakoviny slinivky břišní, což z něj činí klinicky ověřený cíl pro konjugáty protilátek a léčiv (ADC) a další cílené imunoterapeutické přípravky. ADC enfortumab vedotin, který se zaměřuje na Nectin-4, je schválen pro léčbu uroteliálního karcinomu, což podtrhuje terapeutický význam tohoto antigenu.

Buňky CHO-NECTIN4 se široce používají pro vývoj a charakterizaci protilátek namířených proti Nectin-4, konjugátů protilátek a léčiv (ADC), bispecifických protilátek a terapií CAR-T buňkami. Stabilní rekombinantní expresní systém podporuje kvantitativní vazebné testy, hodnocení cytotoxicity ADCC/CDC, studie internalizace receptorů a vysoce výkonné screeningové testy protilátek pomocí průtokové cytometrie. CHO pozadí zajišťuje nízkou endogenní expresi většiny lidských povrchových antigenů, čímž zaručuje, že pozorované signály lze připsat stabilně exprimovanému transgenu Nectin-4. Tato buněčná linie je validována pro použití v procesech vývoje léčiv, výběru předklinických kandidátů a mechanistických studií biologie receptoru Nectin-4.

Tkáň
Ovarium
Nemoc
Vaječníky čínského křečka, nenádorové; geneticky modifikované pro povrchovou expresi NECTIN4 (PVRL4)
Aplikace
Screening protilátek; vývoj ADC; vývoj terapie zaměřené na NECTIN4; výzkum uroteliálního karcinomu a karcinomu prsu; průtoková cytometrie

02Klasifikace

Organismus
čínský křeček
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Adhezivní a suspenzní
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Typ buňky
Epitelové buňky
Doba zdvojnásobení
cca 14–16 hodin

04Identifikátory

Citace
CHO-NECTIN4 (katalogové číslo Cytion 305984)
Daňové identifikační číslo NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05Exprese a náchylnost

Povrchové antigeny
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium

Pro adherentní kultury: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)

Pro suspenzní kultury: Růstové médium CHO A (od společnosti InSCREENeX; katalogové číslo společnosti InSCREENeX INS-ME-1039)

Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Pro adherentní kultury: Doplňte médium o 5% FBS. Přidejte geneticin (G418-Sulfat), abyste dosáhli konečné koncentrace 0,5 mg/ml.
Disociační činidlo
Pro adherentní kultury: Trypsin-EDTA
Subkultivace
Pro běžné kultivace adherentních buněk: Z adherentních buněk odsaďte staré kultivační médium a promyjte je PBS, abyste odstranili veškeré zbývající médium. Po odsátí PBS přidejte příslušný objem roztoku Trypsin/EDTA podle velikosti kultivační nádoby (např. 1 ml pro baňku T25, 3 ml pro baňku T75) a inkubujte při pokojové teplotě nebo 37 °C po dobu 5 až 10 minut nebo dokud se buňky neoddělí. Oddělování sledujte pod mikroskopem a v případě potřeby jemně poklepejte na nádobu, aby se buňky uvolnily. Po oddělení přidejte kompletní médium k inaktivaci trypsinu/EDTA, jemně resuspendujte buňky a alikvotní část buněčné suspenze přeneste do nové kultivační nádoby obsahující čerstvé médium. Umístěte nádobu do inkubátoru nastaveného na 37 °C s 5 %CO2 a každé 2 až 3 dny vyměňte médium.
Poměr rozdělení
1 až 5
Hustota výsevu
2 až 5 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení

Po rozmrazení rozdělte buňky v poměru 1:2 až 1:3 do baněk T25 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazování a adherovat (v případě adherujících kultur).

Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Dospělí