İçeriğe atla
CHO-NECTIN4
Doku
Yumurtalık
Hastalık
Çin hamster yumurtalık hücresi, neoplastik olmayan; NECTIN4 (PVRL4) yüzey ekspresyonu için genetik olarak modifiye edilmiş

CHO-NECTIN4

Cell line · Ürün numarası 305984

Yasal Uyarı: Hücre hatları için gösterilen fiyatlar, yalnızca akademik/kar amacı gütmeyen müşteriler içindir. Ticari kuruluşlar için fiyat...

€1,900.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Yasal Uyarı: Hücre hatları için gösterilen fiyatlar yalnızca akademik/kar amacı gütmeyen müşteriler içindir. Ticari kuruluşlar için fiyat yaklaşık 6.250 €’dur. Ticari bir kuruluşu temsil ediyorsanız veya hangi kategorinin geçerli olduğundan emin değilseniz, lütfen bizimle iletişime geçin.


CHO-NECTIN4 hücreleri, hücre adezyon moleküllerinin nectin ailesine ait bir tip I transmembran proteini olan insan Nectin-4'ü (PVRL4 veya Poliovirüs reseptörü ile ilişkili protein 4 olarak da bilinir) eksprese etmek üzere tasarlanmış, stabil bir rekombinant Çin hamster yumurtalık (CHO) hücre hattıdır. Nectin-4, ürotelyal mesane karsinomu, meme kanseri, küçük hücreli dışı akciğer kanseri ve pankreas kanseri dahil olmak üzere birçok katı tümör tipinde aşırı eksprese edilen, iyi bilinen bir tümörle ilişkili antijendir; bu da onu antikor-ilaç konjugatları (ADC’ler) ve diğer hedefe yönelik immünoterapötikler için klinik olarak doğrulanmış bir hedef haline getirmektedir. Nectin-4’ü hedef alan ADC enfortumab vedotin, ürotelyal karsinom tedavisi için onaylanmıştır; bu da söz konusu antijenin terapötik önemini vurgulamaktadır.

CHO-NECTIN4 hücreleri, Nectin-4'e yönelmiş antikorların, ADC'lerin, bispesifik antikorların ve CAR-T hücre tedavilerinin geliştirilmesi ve karakterizasyonu için yaygın olarak kullanılmaktadır. Kararlı rekombinant ekspresyon sistemi, kantitatif bağlanma testlerini, ADCC/CDC sitotoksisite değerlendirmelerini, reseptör içselleştirme çalışmalarını ve akış sitometrisi ile yüksek verimli antikor taramasını destekler. CHO arka planı, çoğu insan yüzey antijeninin düşük düzeyde endojen ekspresyonunu sağlar ve gözlemlenen sinyallerin, stabil bir şekilde eksprese edilen Nectin-4 transgenine atfedilebilmesini garanti eder. Bu hücre hattı, ilaç keşfi iş akışlarında, preklinik aday seçiminde ve Nectin-4 reseptör biyolojisinin mekanistik çalışmalarında kullanım için doğrulanmıştır.

Doku
Yumurtalık
Hastalık
Çin hamster yumurtalık hücresi, neoplastik olmayan; NECTIN4 (PVRL4) yüzey ekspresyonu için genetik olarak modifiye edilmiş
Uygulamalar
Antikor taraması; ADC geliştirme; NECTIN4’ü hedef alan tedavi geliştirme; ürotelyal/meme kanseri araştırması; akış sitometrisi

02Sınıflandırma

Canlı
Çin hamsteri
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Yapışkan ve süspansiyon
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Hücre türü
Epitel hücreleri
İki katına çıkma süresi
yaklaşık 14-16 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
CHO-NECTIN4 (Cytion katalog numarası 305984)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05İfade ve duyarlılık

Yüzey antijenleri
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri

Yapışık kültürler için: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)

Süspansiyon kültürleri için: CHO Büyüme Ortamı A (InSCREENeX'ten; InSCREENeX katalog numarası INS-ME-1039)

Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Yapışık kültürler için: Ortamı %5 FBS ile takviye edin. Nihai konsantrasyonu 0,5 mg/mL elde etmek için Geneticin (G418-Sulfat) ekleyin.
Ayrıştırma reaktifi
Yapışık kültürler için: Tripsin-EDTA
Alt kültür oluşturma
Rutin yapışık hücre kültürü için: Yapışık hücrelerden eski kültür ortamını aspire edin ve kalan ortamı çıkarmak için PBS ile yıkayın. PBS'yi aspire ettikten sonra kültür kabı boyutuna göre uygun hacimde Tripsin/EDTA solüsyonu ekleyin (örn. T25 şişesi için 1 ml, T75 şişesi için 3 ml) ve oda sıcaklığında veya 37°C'de 5-10 dakika veya hücreler ayrılana kadar inkübe edin. Mikroskop altında ayrılmayı izleyin ve gerekirse hücreleri serbest bırakmak için kaba hafifçe vurun. Hücreler ayrıldıktan sonra Tripsin/EDTA'yı inaktive etmek için tam ortam ekleyin, hücreleri nazikçe yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunun bir alikotunu taze ortam içeren yeni bir kültür kabına aktarın. Kabı %5CO2 ile 37°C'ye ayarlanmış bir inkübatöre yerleştirin ve ortamı 2-3 günde bir değiştirin.
Bölünme oranı
1'den 5'e kadar
Ekim yoğunluğu
2 ila 5 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma

Çözüldükten sonra, hücreleri 1:2 ila 1:3 oranında T25 flasklara bölün ve hücrelerin donma sürecinden kurtulmasına ve en az 24 saat boyunca yapışmasına (yapışkan kültürler için) izin verin.

Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Yetişkin