
- Tissue
- שחלה
- Disease
- שחלת אוגר סיני, לא-נאופלסטית; מהונדסת גנטית לביטוי NECTIN4 (PVRL4) על פני השטח
Documents
CHO-NECTIN4
Cell line · Product number 305984
Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entities the pri...
01General information
- Description
הצהרת פטור מאחריות: המחירים המוצגים עבור קווי התאים מיועדים אך ורק ללקוחות אקדמיים או ללא כוונת רווח. עבור גופים מסחריים, המחיר הוא כ-6,250 אירו. אם אתם מייצגים גוף מסחרי או שאינכם בטוחים לאיזו קטגוריה אתם משתייכים, אנא צרו איתנו קשר.
תאי CHO-NECTIN4 הם קו תאים רקומביננטי יציב של שחלות אוגר סיני (CHO), שהונדס כדי לבטא את Nectin-4 האנושי (הידוע גם כ-PVRL4 או חלבון 4 הקשור לקולטן נגיף הפוליו), חלבון טרנסממברני מסוג I השייך למשפחת הנקטין של מולקולות הדבקה התאית. Nectin-4 הוא אנטיגן הקשור לגידולים, המוכר היטב, אשר מבוטא ביתר במספר סוגים של גידולים מוצקים, כולל קרצינומה של שלפוחית השתן, סרטן השד, סרטן ריאות תאי לא קטנים וסרטן הלבלב, מה שהופך אותו למטרה מאושרת קלינית עבור קומפלקסים של נוגדנים ותרופות (ADC) וטיפולים אימונולוגיים ממוקדים אחרים. ה-ADC enfortumab vedotin, המכוון ל-Nectin-4, אושר לטיפול בקרצינומה של האפיתל, דבר המדגיש את הרלוונטיות הטיפולית של אנטיגן זה.
תאי CHO-NECTIN4 נמצאים בשימוש נרחב לפיתוח ואפיון נוגדנים המכוונים ל-Nectin-4, ADCs, נוגדנים דו-ספציפיים וטיפולי תאי CAR-T. מערכת הביטוי הרקומביננטית היציבה תומכת בבדיקות קישור כמותיות, בהערכות ציטוטוקסיות של ADCC/CDC, במחקרים על פנימיזציה של קולטנים ובסינון נוגדנים בתפוקה גבוהה באמצעות ציטומטריית זרימה. רקע ה-CHO מספק ביטוי אנדוגני נמוך של מרבית האנטיגנים האנושיים על פני השטח, מה שמבטיח שהאותות הנצפים נובעים מהטרנסגן Nectin-4 המובע באופן יציב. קו תאים זה מאושר לשימוש בתהליכי גילוי תרופות, בבחירת מועמדים פרה-קליניים ובמחקרים מכניסטיים על הביולוגיה של קולטן Nectin-4.
- Tissue
- שחלה
- Disease
- שחלת אוגר סיני, לא-נאופלסטית; מהונדסת גנטית לביטוי NECTIN4 (PVRL4) על פני השטח
- Applications
- בדיקת נוגדנים; פיתוח ADC; פיתוח טיפול המכוון ל-NECTIN4; מחקר על סרטן שלפוחית השתן/סרטן השד; ציטומטריית זרימה
02Classification
- Organism
- Chinese hamster
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent and suspension
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- תאי אפיתל
- Doubling time
- כ-14–16 שעות
04Identifiers
- Citation
- CHO-NECTIN4 (מספר קטלוגי של Cytion: 305984)
- NCBI TaxID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8W9
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- NECTIN4 (PVRL4/CD112R)
06Handling and culture
- Culture medium
לתרבויות דבקות: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
לתרבויות בתמיסה: CHO Growth Medium A (מ-InSCREENeX; מספר קטלוגי InSCREENeX INS-ME-1039)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- לתרבויות דבקות: הוסף לתמיסה 5% FBS. הוסף Geneticin (G418-Sulfat) כדי להגיע לריכוז סופי של 0.5 מ"ג/מ"ל.
- Dissociation reagent
- לתרבויות דבקות: טריפסין-EDTA
- Subculturing
- לגידול תאים נצמדים שגרתי: שאבו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS כדי להסיר את כל שאריות המדיום. לאחר שאיבת ה-PBS, הוסף את הנפח המתאים של תמיסת טריפסין/EDTA בהתאם לגודל כלי התרבית (לדוגמה, 1 מ"ל עבור בקבוק T25, 3 מ"ל עבור בקבוק T75) והדגיר בטמפרטורת החדר או ב-37°C למשך 5-10 דקות, או עד שהתאים יתנתקו. עקבו אחר ההתנתקות תחת מיקרוסקופ, ובמידת הצורך טפחו קלות על הכלי כדי לשחרר את התאים. לאחר ההתנתקות, הוסיפו מצע מלא כדי להשבית את הטריפסין/EDTA, ערבבו קלות את התאים והעבירו חלק מהתאים המושהים לכלי תרבית חדש המכיל מצע טרי. הכניסו את הכלי לאינקובטור המכוון ל-37°C עם 5%CO2, והחליפו את המצע כל 2-3 ימים.
- Split ratio
- 1 עד 5
- Seeding density
- 2 עד 5 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, חלק את התאים ביחס של 1:2 עד 1:3 בצלוחיות T25 והמתן לפחות 24 שעות עד שהתאים יתאוששו מתהליך ההקפאה וידבקו (בתרבויות דבקות).
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- מבוגר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Disclaimer
- התאים שלנו מיועדים אך ורק למטרות מחקר במעבדה במבחנה, ואינם מיועדים לשימוש קליני או אבחוני, ולא מיועדים לטיפול בבני אדם או לשימוש וטרינרי. על המשתמשים להקפיד על כל ההנחיות והתקנות החלות על טיפול ושימוש בתאים אלה בסביבת מחקר.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Third-party agreements apply
- Yes


.jpg)