- Vev
- Eggstokk
- Sykdom
- Eggstokk fra kinesisk hamster, ikke-neoplastisk; genetisk modifisert for overflateekspresjon av NECTIN4 (PVRL4)
Dokumenter
CHO-NECTIN4
Cell line · Produktnummer 305984
Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og kunder i ideelle organisasjoner. For kommersielle aktører gjelder prisene...
Tilpasning / Anbefalinger
- CHO-NECTIN4Cell line€1,900.00
01Generell informasjon
- Beskrivelse
Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og kunder uten profittformål. For kommersielle aktører er prisen ca. 6 250 euro. Hvis du representerer en kommersiell aktør eller er usikker på hvilken kategori som gjelder, ber vi deg kontakte oss.
CHO-NECTIN4-celler er en stabil rekombinant cellelinje fra kinesisk hamster-eggstokk (CHO), utviklet for å uttrykke humant Nectin-4 (også kjent som PVRL4 eller poliovirusreseptorrelatert protein 4), et type I-transmembranprotein som tilhører nectin-familien av celleadhesjonsmolekyler. Nectin-4 er et velkjent tumorassosiert antigen som overuttrykkes i flere typer solide svulster, blant annet urotelialt blærekarsinom, brystkreft, ikke-småcellet lungekreft og bukspyttkjertelkreft, noe som gjør det til et klinisk validert mål for antistoff-legemiddelkonjugater (ADC-er) og andre målrettede immunterapier. ADC-et enfortumab vedotin, som retter seg mot Nectin-4, er godkjent for behandling av urotelialt karsinom, noe som understreker den terapeutiske relevansen av dette antigenet.
CHO-NECTIN4-celler brukes i stor utstrekning til utvikling og karakterisering av Nectin-4-rettede antistoffer, ADC-er, bispesifikke antistoffer og CAR-T-cellebehandlinger. Det stabile rekombinante ekspresjonssystemet støtter kvantitative bindingsanalyser, ADCC/CDC-cytotoksisitetsvurderinger, studier av reseptorinternalisering og antistoffscreening med høy gjennomstrømning ved hjelp av strømningscytometri. CHO-bakgrunnen gir lavt endogent uttrykk av de fleste humane overflateantigener, noe som sikrer at observerte signaler kan tilskrives det stabilt uttrykte Nectin-4-transgenet. Denne cellelinjen er validert for bruk i arbeidsflyter for legemiddelutvikling, preklinisk kandidatutvelgelse og mekanistiske studier av Nectin-4-reseptorbiologi.
- Vev
- Eggstokk
- Sykdom
- Eggstokk fra kinesisk hamster, ikke-neoplastisk; genetisk modifisert for overflateekspresjon av NECTIN4 (PVRL4)
- Søknader
- Antistoffscreening; utvikling av ADC; utvikling av NECTIN4-rettet terapi; forskning på urotelial kreft og brystkreft; strømningscytometri
02Klassifisering
- Organisme
- Kinesisk hamster
- Sex
- Kvinne
- Vekstegenskaper
- Adhesjon og suspensjon
- GMO-status
- GMO-S1
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende
- Celletype
- Epitelceller
- Fordoblingstid
- ca. 14–16 timer
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- CHO-NECTIN4 (Cytion-katalognummer 305984)
- NCBI-skattenummer
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8W9
05Uttrykk og mottakelighet
- Overflateantigener
- NECTIN4 (PVRL4/CD112R)
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
For adherente kulturer: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
For suspensjonskulturer: CHO Growth Medium A (fra InSCREENeX; InSCREENeX katalognummer INS-ME-1039)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- For adherente kulturer: Suppler mediet med 5 % FBS. Tilsett Geneticin (G418-Sulfat) for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 0,5 mg/ml.
- Dissosiasjonsmiddel
- For adherente kulturer: Trypsin-EDTA
- Subkultivering
- For rutinemessig adherent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS for å fjerne eventuelt gjenværende medium. Etter at PBS er aspirert, tilsett et passende volum Trypsin/EDTA-løsning basert på størrelsen på dyrkingskaret (f.eks. 1 ml for en T25-kolbe, 3 ml for en T75-kolbe), og inkuber ved romtemperatur eller 37 °C i 5-10 minutter, eller til cellene løsner. Overvåk løsrivelsen under mikroskop, og bank forsiktig på beholderen om nødvendig for å frigjøre cellene. Når cellene har løsnet, tilsetter du komplett medium for å inaktivere trypsin/EDTA, resuspenderer cellene forsiktig og overfører en alikvot av cellesuspensjonen til et nytt dyrkingskar som inneholder nytt medium. Plasser karet i en inkubator innstilt på 37 °C med 5 %CO2, og bytt medium hver 2.-3. dag.
- Oppdelingsforhold
- 1 til 5
- Såtetthet
- 2 til 5 x 104 celler/cm2
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Gjenoppretting etter tining
Etter tining deles cellene i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellene får komme seg etter fryseprosessen og feste seg (for adherente kulturer) i minst 24 timer.
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- Voksen
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Ansvarsfraskrivelse
- Cellene våre leveres utelukkende til in vitro-laboratorieforskningsformål og er ikke ment for klinisk eller diagnostisk bruk, og de skal heller ikke administreres til mennesker eller brukes til veterinærformål. Brukere må overholde alle gjeldende retningslinjer og forskrifter for håndtering og bruk av disse cellene i forskningssammenheng.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtaler med tredjeparter gjelder
- Ja
.jpg)