Gå direkte til indholdet
CHO-NECTIN4
Væv
Æggestokkene
Sygdom
Æggestokceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modificeret til overfladeekspression af NECTIN4 (PVRL4)

Dokumenter

CHO-NECTIN4

Cell line · Varenummer 305984

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser på cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder gælder pr...

€1,900.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: De angivne priser for cellelinjer gælder udelukkende for akademiske kunder og kunder uden gevinst for øje. For kommercielle virksomheder er prisen ca. 6.250 €. Hvis du repræsenterer en kommerciel virksomhed eller er i tvivl om, hvilken kategori der gælder, bedes du kontakte os.


CHO-NECTIN4-celler er en stabil rekombinant cellelinje fra kinesisk hamster-æggestok (CHO), der er udviklet til at udtrykke humant Nectin-4 (også kendt som PVRL4 eller Poliovirus receptor-related protein 4), et type I-transmembranprotein, der tilhører nectin-familien af celleadhæsionsmolekyler. Nectin-4 er et velkendt tumorassocieret antigen, der overekspresseres i flere typer solide tumorer, herunder urothelial blærekræft, brystkræft, ikke-småcellet lungekræft og bugspytkirtelkræft, hvilket gør det til et klinisk valideret mål for antistof-lægemiddelkonjugater (ADC'er) og andre målrettede immunterapeutika. ADC’en enfortumab vedotin, der er rettet mod Nectin-4, er godkendt til behandling af urothelialt karcinom, hvilket understreger dette antigens terapeutiske relevans.

CHO-NECTIN4-celler anvendes i vid udstrækning til udvikling og karakterisering af Nectin-4-rettede antistoffer, ADC’er, bispecifikke antistoffer og CAR-T-celleterapier. Det stabile rekombinante ekspressionssystem understøtter kvantitative bindingsassays, ADCC/CDC-cytotoksicitetsvurderinger, undersøgelser af receptorinternalisering samt højkapacitets-antistofscreening ved hjælp af flowcytometri. CHO-baggrunden sikrer lav endogen ekspression af de fleste humane overfladeantigener, hvilket garanterer, at de observerede signaler kan tilskrives det stabilt eksprimerede Nectin-4-transgen. Denne cellelinje er valideret til brug i arbejdsgange inden for lægemiddelforskning, præklinisk kandidatudvælgelse og mekanistiske undersøgelser af Nectin-4-receptorbiologi.

Væv
Æggestokkene
Sygdom
Æggestokceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modificeret til overfladeekspression af NECTIN4 (PVRL4)
Anvendelser
Antistofscreening; udvikling af ADC’er; udvikling af NECTIN4-målrettet terapi; forskning i urothelial kræft og brystkræft; flowcytometri

02Klassificering

Organisme
Kinesisk hamster
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Adhæsion og suspension
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitheliale celler
Fordoblingstid
ca. 14–16 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CHO-NECTIN4 (Cytion-katalognummer 305984)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05Udtryk og modtagelighed

Overfladeantigener
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium

Til klæbende kulturer: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)

Til suspensionskulturer: CHO Growth Medium A (fra InSCREENeX; InSCREENeX katalognummer INS-ME-1039)

Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Til klæbende kulturer: Suppler mediet med 5 % FBS. Tilsæt Geneticin (G418-Sulfat) for at opnå en endelig koncentration på 0,5 mg/mL.
Dissociationsreagens
Til klæbende kulturer: Trypsin-EDTA
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C i 5-10 minutter, eller indtil cellerne løsner sig. Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
Opdelingsforhold
1 til 5
Såtæthed
2 til 5 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning

Efter optøning deles cellerne i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellerne får lov til at komme sig over fryseprocessen og klæbe (for klæbende kulturer) i mindst 24 timer.

Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Voksen