Siirry sisältöön
CHO-NECTIN4
Kudos
Munasarja
Sairaus
Kiinalaisen hamsterin munasarjasolut, ei-neoplastiset; geneettisesti muunnettu NECTIN4 (PVRL4)-proteiinin ilmentymiseksi solun pinnalla

Asiakirjat

CHO-NECTIN4

Cell line · Tuotenumero 305984

Vastuuvapauslauseke: Solulinjojen kohdalla ilmoitetut hinnat koskevat yksinomaan akateemisia ja voittoa tavoittelemattomia asiakkaita. Kaupallisten toimijoiden osalta hinnat...

€1,900.00ilman veroja ja toimituskuluja
Valmistetaan tilauksesta
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Vastuuvapauslauseke: Solulinjojen kohdalla ilmoitetut hinnat koskevat yksinomaan akateemisia ja voittoa tavoittelemattomia asiakkaita. Kaupallisille toimijoille hinta on noin 6 250 euroa. Jos edustat kaupallista toimijaa tai et ole varma, mihin ryhmään kuulut, ota meihin yhteyttä.


CHO-NECTIN4-solut ovat vakaa rekombinantti kiinalaisen hamsterin munasarjasolulinja (CHO), joka on muokattu ilmentämään ihmisen Nectin-4:ää (tunnetaan myös nimellä PVRL4 tai poliovirusreseptoriin liittyvä proteiini 4), joka on tyypin I transmembraaniproteiini ja kuuluu solujen adheesiomolekyylien nectin-perheeseen. Nectin-4 on vakiintunut tuumoriin liittyvä antigeeni, jota ilmentyy liikaa useissa kiinteissä kasvaintyypeissä, mukaan lukien virtsarakon uroteelinen karsinooma, rintasyöpä, ei-pienisoluinen keuhkosyöpä ja haimasyöpä, mikä tekee siitä kliinisesti validoidun kohteen vasta-aine-lääke-konjugaateille (ADC) ja muille kohdennetuille immunoterapioille. Nectin-4:ään kohdistuva ADC-valmiste enfortumab vedotin on hyväksytty uroteelisen karsinooman hoitoon, mikä korostaa tämän antigeenin terapeuttista merkitystä.

CHO-NECTIN4-soluja käytetään laajalti Nectin-4:ään kohdistuvien vasta-aineiden, ADC-yhdisteiden, bispesifisten vasta-aineiden ja CAR-T-soluterapioiden kehittämisessä ja karakterisoinnissa. Vakaa rekombinanttinen ilmentymisjärjestelmä tukee kvantitatiivisia sitoutumismäärityksiä, ADCC/CDC-sytotoksisuusarviointeja, reseptorin internalisaatiotutkimuksia sekä virtaussytometrian avulla tehtävää suurikapasiteettista vasta-aineiden seulontaa. CHO-tausta takaa useimpien ihmisen pinta-antigeenien alhaisen endogeenisen ilmentymisen, mikä varmistaa, että havaitut signaalit johtuvat vakaasti ilmentyvästä Nectin-4-transgeenistä. Tämä solulinja on validoitu käytettäväksi lääkekehitysprosesseissa, prekliinisten ehdokkaiden valinnassa sekä Nectin-4-reseptorin biologian mekanistisissa tutkimuksissa.

Kudos
Munasarja
Sairaus
Kiinalaisen hamsterin munasarjasolut, ei-neoplastiset; geneettisesti muunnettu NECTIN4 (PVRL4)-proteiinin ilmentymiseksi solun pinnalla
Sovellukset
Vasta-aineiden seulonta; ADC-lääkkeiden kehittäminen; NECTIN4:ään kohdistuvan hoidon kehittäminen; uroteelisyövän ja rintasyövän tutkimus; virtaussytometria

02Luokittelu

Organismi
kiinalainen hamsteri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kaksinkertaistumisaika
noin 14–16 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
CHO-NECTIN4 (Cytion-tuotenumero 305984)
NCBI-verotunnus
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05Ilmentyminen ja alttius

Pinta-antigeenit
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta

Tarttuvia viljelmiä varten: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)

Suspensioviljelmiä varten: CHO Growth Medium A (InSCREENeXiltä; InSCREENeXin luettelonumero INS-ME-1039)

Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Tarttuvia viljelmiä varten: Täydennä väliaineeseen 5 % FBS:ää. Lisää genetisiiniä (G418-Sulfat), jotta lopullinen pitoisuus on 0,5 mg/ml.
Dissosiaatioreagenssi
Tarttuvia viljelmiä varten: Trypsin-EDTA
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa 5-10 minuuttia tai kunnes solut irtoavat. Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta osa uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
2–5 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen

Sulattamisen jälkeen solut jaetaan T25-pulloihin suhteessa 1:2 tai 1:3 ja annetaan solujen toipua pakastuksesta ja adheesiota (adheesioviljelmien osalta) vähintään 24 tuntia.

Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset