CHO-NECTIN4

Avertissement : Les prix indiqués pour les lignées cellulaires s’adressent exclusivement aux clients du milieu universitaire ou à but non lucratif. Pour les entités commerciales, le prix est d’environ 6 250 €. Si vous représentez une entité commerciale ou si vous ne savez pas à quelle catégorie vous appartenez, veuillez nous contacter.

Les cellules CHO-NECTIN4 constituent une lignée cellulaire stable recombinante dérivée d’ovaires de hamster chinois (CHO), conçue pour exprimer la nectine-4 humaine (également connue sous le nom de PVRL4 ou protéine 4 apparentée au récepteur du poliovirus), une protéine transmembranaire de type I appartenant à la famille des nectines, des molécules d’adhésion cellulaire. La nectine-4 est un antigène associé aux tumeurs bien établi qui est surexprimé dans plusieurs types de tumeurs solides, notamment le carcinome urothélial de la vessie, le cancer du sein, le cancer du poumon à cellules non petites et le cancer du pancréas, ce qui en fait une cible cliniquement validée pour les conjugués anticorps-médicaments (ADC) et d’autres immunothérapies ciblées. L’ADC enfortumab vedotin, qui cible la nectine-4, est approuvé pour le traitement du carcinome urothélial, ce qui souligne la pertinence thérapeutique de cet antigène.

Les cellules CHO-NECTIN4 sont largement utilisées pour le développement et la caractérisation d’anticorps dirigés contre la Nectine-4, d’ADC, d’anticorps bispécifiques et de thérapies à base de cellules CAR-T. Ce système d’expression recombinant stable permet de réaliser des essais de liaison quantitatifs, des évaluations de cytotoxicité ADCC/CDC, des études d’internalisation des récepteurs et un criblage à haut débit d’anticorps par cytométrie en flux. La lignée CHO présente une faible expression endogène de la plupart des antigènes de surface humains, ce qui garantit que les signaux observés sont attribuables au transgène Nectin-4 exprimé de manière stable. Cette lignée cellulaire est validée pour une utilisation dans les processus de découverte de médicaments, la sélection de candidats précliniques et les études mécanistiques sur la biologie du récepteur Nectin-4.

Pour les cultures adhérentes : DMEM : Ham’s F12 (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)

Pour les cultures en suspension : milieu de croissance CHO A (de InSCREENeX; numéro de catalogue InSCREENeX INS-ME-1039)

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

Après la décongélation, divisez les cellules dans un rapport de 1:2 à 1:3 dans des flacons T25 et laissez-les se remettre du processus de congélation et adhérer (pour les cultures adhérentes) pendant au moins 24 heures.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.