CHO-NECTIN4

Zastrzeżenie: Podane ceny linii komórkowych dotyczą wyłącznie klientów akademickich lub organizacji non-profit. Dla podmiotów komercyjnych cena wynosi około 6 250 euro. Jeśli reprezentujesz podmiot komercyjny lub nie masz pewności, która kategoria ma zastosowanie, skontaktuj się z nami.

Komórki CHO-NECTIN4 to stabilna rekombinowana linia komórkowa pochodząca z jajników chomika chińskiego (CHO), zmodyfikowana genetycznie w celu ekspresji ludzkiej Nectin-4 (znanej również jako PVRL4 lub białko 4 związane z receptorem poliowirusa), białka transbłonowego typu I należącego do rodziny nektyn – cząsteczek adhezyjnych komórek. Nektina-4 jest dobrze znanym antygenem związanym z nowotworami, który ulega nadekspresji w wielu typach nowotworów litych, w tym w raku urotelialnym pęcherza moczowego, raku piersi, niedrobnokomórkowym raku płuca oraz raku trzustki, co czyni ją klinicznie zweryfikowanym celem dla koniugatów przeciwciał z lekami (ADC) i innych ukierunkowanych immunoterapii. Konjugat przeciwciało-lek (ADC) o nazwie enfortumab vedotin, którego celem jest Nectin-4, został zatwierdzony do leczenia raka urotelialnego, co podkreśla terapeutyczne znaczenie tego antygenu.

Komórki CHO-NECTIN4 są szeroko stosowane do opracowywania i charakteryzowania przeciwciał skierowanych przeciwko Nectin-4, koniugatów przeciwciało-lek (ADC), przeciwciał bispecyficznych oraz terapii komórkami CAR-T. Ten stabilny system ekspresji rekombinowanej umożliwia przeprowadzanie ilościowych testów wiązania, ocen cytotoksyczności ADCC/CDC, badań internalizacji receptorów oraz wysokoprzepustowego przesiewania przeciwciał za pomocą cytometrii przepływowej. Tło komórkowe CHO charakteryzuje się niskim poziomem endogennej ekspresji większości ludzkich antygenów powierzchniowych, co gwarantuje, że obserwowane sygnały wynikają ze stabilnie ekspresjonowanego transgenu Nectin-4. Linia komórkowa została zatwierdzona do stosowania w procesach odkrywania leków, przedklinicznej selekcji kandydatów oraz badaniach mechanistycznych dotyczących biologii receptora Nectin-4.

Dla hodowli adherentnych: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)

Dla hodowli zawiesinowych: CHO Growth Medium A (od InSCREENeX; numer katalogowy InSCREENeX INS-ME-1039)

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

Po rozmrożeniu rozdzielić komórki w stosunku 1:2 do 1:3 w kolbach T25 i pozwolić komórkom na regenerację po procesie zamrażania i przyleganie (w przypadku hodowli adherentnych) przez co najmniej 24 godziny.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym