Tartalomra ugrás
CHO-NECTIN4
Szövet
Petefészek
Betegség
Kínai hörcsög petefészeksejt, nem neoplasztikus; a NECTIN4 (PVRL4) felszíni expressziójára génmódosítva

Dokumentumok

CHO-NECTIN4

Cell line · Termékszám 305984

Jogi nyilatkozat: A sejtvonalaknál feltüntetett árak kizárólag tudományos/non-profit ügyfelekre vonatkoznak. Kereskedelmi szervezetek esetében az árak...

€1,900.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Rendelésre készül
1

01Általános információk

Leírás

Jogi nyilatkozat: A sejtvonalak mellett feltüntetett árak kizárólag tudományos/non-profit ügyfelekre vonatkoznak. Kereskedelmi szervezetek esetében az ár körülbelül 6 250 €. Amennyiben kereskedelmi szervezetet képvisel, vagy nem biztos abban, hogy melyik kategória vonatkozik Önre, kérjük, vegye fel velünk a kapcsolatot.


A CHO-NECTIN4 sejtek egy stabil, rekombináns kínai hörcsög petefészek (CHO) sejtvonal, amelyet úgy alakítottak ki, hogy kifejezze az emberi Nectin-4-et (más néven PVRL4 vagy poliovírus-receptorhoz kapcsolódó 4. fehérje), egy I. típusú transzmembrán fehérjét, amely a sejtadhéziós molekulák nectin családjába tartozik. A Nectin-4 egy jól ismert, tumorhoz kapcsolódó antigén, amely számos szilárd tumor típusában túltermelődik, ideértve a hólyag hámsejtes karcinómáját, az emlőrákot, a nem kissejtes tüdőrákot és a hasnyálmirigyrákot, ami klinikailag validált célponttá teszi az antitest-gyógyszer konjugátumok (ADC-k) és más célzott immunterápiás szerek számára. A Nectin-4-et célzó enfortumab vedotin nevű ADC-t az urotheliális karcinóma kezelésére engedélyezték, ami aláhúzza ezen antigén terápiás jelentőségét.

A CHO-NECTIN4 sejteket széles körben használják a Nectin-4-re irányuló antitestek, ADC-k, bispecifikus antitestek és CAR-T-sejtterápiák fejlesztéséhez és jellemzéséhez. A stabil rekombináns expressziós rendszer támogatja a kvantitatív kötődési vizsgálatokat, az ADCC/CDC citotoxicitási értékeléseket, a receptor-internalizációs vizsgálatokat, valamint a nagy áteresztőképességű antitest-szűrést áramlási citometriával. A CHO-háttér a legtöbb humán felszíni antigén alacsony endogén expresszióját biztosítja, így garantálva, hogy a megfigyelt jelek a stabilan expresszált Nectin-4 transzgénnek tulajdoníthatók. Ez a sejtvonal validálva van gyógyszerkifejlesztési munkafolyamatokban, preklinikai jelöltkiválasztásban, valamint a Nectin-4 receptor biológiájának mechanisztikus vizsgálataiban való felhasználásra.

Szövet
Petefészek
Betegség
Kínai hörcsög petefészeksejt, nem neoplasztikus; a NECTIN4 (PVRL4) felszíni expressziójára génmódosítva
Alkalmazások
Antitest-szűrés; ADC-fejlesztés; NECTIN4-célzott terápia fejlesztése; urotheliális/mellrák-kutatás; áramlási citometria

02Osztályozás

Organizmus
kínai hörcsög
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Adherens és szuszpenziós
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek
Kettőzési idő
kb. 14–16 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
CHO-NECTIN4 (Cytion katalógusszám: 305984)
NCBI adóazonosító szám
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05Kifejeződés és fogékonyság

Felszíni antigének
NECTIN4 (PVRL4/CD112R)

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj

Adhezív kultúrákhoz: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)

Szuszpenziós kultúrákhoz: CHO Growth Medium A (az InSCREENeX-től; az InSCREENeX katalógusszáma: INS-ME-1039)

Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
Adhezív kultúrákhoz: A táptalajt 5% FBS-szel egészítsük ki. Adjunk hozzá geneticint (G418-Sulfat), hogy a végső koncentráció 0,5 mg/ml legyen.
Diszociációs reagens
Adhezív kultúrákhoz: Trypsin-EDTA
Átültetés
Rutinszerű adherens sejtkultúrához: Szívja le a régi táptalajt az adherens sejtekről, és mossa le őket PBS-szel a maradék táptalaj eltávolítása érdekében. A PBS leszívása után adjunk hozzá a tenyésztőedény méretének megfelelő mennyiségű tripszin/EDTA-oldatot (pl. 1 ml T25 lombik esetén, 3 ml T75 lombik esetén), és inkubáljuk szobahőmérsékleten vagy 37°C-on 5-10 percig, vagy amíg a sejtek leválnak. Ellenőrizzük a leválást mikroszkóp alatt, és ha szükséges, óvatosan kopogtassuk meg az edényt a sejtek kiszabadításához. A leválás után adjunk hozzá teljes tápfolyadékot a tripszin/EDTA inaktiválásához, óvatosan szuszpendáljuk újra a sejteket, és a sejtszuszpenzió egy aliquotáját helyezzük át egy új, friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőedénybe. Helyezze az edényt 37 °C-ra és 5%CO2-ra beállított inkubátorba, és 2-3 naponta cserélje a tápfolyadékot.
Osztási arány
1–5
Ültetési sűrűség
2–5 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás

A felolvasztás után osszuk a sejteket 1:2-1:3 arányban T25 lombikokba, és hagyjuk, hogy a sejtek legalább 24 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztásból és megtapadjanak (adhezív kultúrák esetén).

Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Felnőtt