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CHO-NECTINA4
Pañuelo de papel
Ovario
Enfermedad
Ovario de hámster chino, no neoplásico; modificado genéticamente para la expresión de NECTIN4 (PVRL4) en la superficie

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CHO-NECTINA4

Cell line · Número de producto 305984

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes del ámbito académico o sin ánimo de lucro. Para las entidades comerciales, el pre...

€1,900.00sin impuestos ni gastos de envío
Hecho por encargo
1

01Información general

Descripción

Aviso legal: Los precios que se muestran para las líneas celulares son exclusivamente para clientes del ámbito académico o sin ánimo de lucro. Para las entidades comerciales, el precio es de aproximadamente 6.250 €. Si representa a una entidad comercial o no está seguro de a qué categoría pertenece, póngase en contacto con nosotros.


Las células CHO-NECTIN4 son una línea celular recombinante estable derivada de ovario de hámster chino (CHO), diseñada para expresar la nectina-4 humana (también conocida como PVRL4 o proteína 4 relacionada con el receptor del poliovirus), una proteína transmembrana de tipo I perteneciente a la familia de las nectinas, un grupo de moléculas de adhesión celular. La nectina-4 es un antígeno asociado a tumores bien establecido que se sobreexpresa en múltiples tipos de tumores sólidos, entre ellos el carcinoma urotelial de vejiga, el cáncer de mama, el cáncer de pulmón no microcítico y el cáncer de páncreas, lo que la convierte en una diana clínicamente validada para los conjugados de anticuerpos y fármacos (ADC) y otras inmunoterapias dirigidas. El ADC enfortumab vedotin, que tiene como diana la nectina-4, está autorizado para el tratamiento del carcinoma urotelial, lo que subraya la relevancia terapéutica de este antígeno.

Las células CHO-NECTIN4 se utilizan ampliamente para el desarrollo y la caracterización de anticuerpos dirigidos contra la Nectina-4, ADC, anticuerpos biespecíficos y terapias con células CAR-T. El sistema de expresión recombinante estable permite realizar ensayos de unión cuantitativos, evaluaciones de citotoxicidad ADCC/CDC, estudios de internalización de receptores y cribado de anticuerpos de alto rendimiento mediante citometría de flujo. El fondo celular CHO presenta una baja expresión endógena de la mayoría de los antígenos de superficie humanos, lo que garantiza que las señales observadas sean atribuibles al transgén de Nectina-4 expresado de forma estable. Esta línea celular está validada para su uso en flujos de trabajo de descubrimiento de fármacos, selección de candidatos preclínicos y estudios mecanísticos de la biología del receptor de Nectina-4.

Pañuelo de papel
Ovario
Enfermedad
Ovario de hámster chino, no neoplásico; modificado genéticamente para la expresión de NECTIN4 (PVRL4) en la superficie
Aplicaciones
Cribado de anticuerpos; desarrollo de ADC; desarrollo de terapias dirigidas contra NECTIN4; investigación sobre el cáncer urotelial y de mama; citometría de flujo

02Clasificación

Organismo
Hámster chino
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente y en suspensión
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This CHO cell line contains a NECTIN4 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales
Tiempo de duplicación
aprox. 14-16 horas

04Identificadores

Referencia
CHO-NECTIN4 (número de catálogo de Cytion 305984)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W9

05Expresión y susceptibilidad

Antígenos de superficie
NECTINA 4 (PVRL4/CD112R)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo

Para cultivos adherentes: DMEM:F12 de Ham (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)

Para cultivos en suspensión: CHO Growth Medium A (de InSCREENeX; número de catálogo de InSCREENeX INS-ME-1039)

Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Para cultivos adherentes: Suplementar el medio con un 5% de FBS. Añadir Geneticina (G418-Sulfat) hasta alcanzar una concentración final de 0,5 mg/mL.
Reactivo de disociación
Para cultivos adherentes: Tripsina-EDTA
Subcultivo
Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C durante 5-10 minutos, o hasta que las células se desprendan. Controlar el desprendimiento al microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
De 2 a 5 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación

Tras la descongelación, dividir las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y dejar que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (para cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Adultos