CHO-NECTINA4

Avviso legale: I prezzi indicati per le linee cellulari sono riservati esclusivamente a clienti del settore accademico o senza scopo di lucro. Per le entità commerciali il prezzo è di circa 6.250 €. Se rappresentate un’entità commerciale o non siete sicuri di quale categoria vi riguardi, vi preghiamo di contattarci.

Le cellule CHO-NECTIN4 sono una linea cellulare ricombinante stabile derivata dall’ovaio del criceto cinese (CHO), ingegnerizzata per esprimere la Nectina-4 umana (nota anche come PVRL4 o proteina 4 correlata al recettore del poliovirus), una proteina transmembrana di tipo I appartenente alla famiglia delle nectine, molecole di adesione cellulare. La Nectina-4 è un antigene associato al tumore ben consolidato, sovraespresso in diversi tipi di tumori solidi, tra cui il carcinoma uroteliale della vescica, il carcinoma mammario, il carcinoma polmonare non a piccole cellule e il carcinoma pancreatico, il che la rende un bersaglio clinicamente validato per i coniugati anticorpo-farmaco (ADC) e altre immunoterapie mirate. L’ADC enfortumab vedotin, che ha come bersaglio la Nectina-4, è approvato per il trattamento del carcinoma uroteliale, a conferma della rilevanza terapeutica di questo antigene.

Le cellule CHO-NECTIN4 sono ampiamente utilizzate per lo sviluppo e la caratterizzazione di anticorpi diretti contro la Nectina-4, ADC, anticorpi bispecifici e terapie con cellule CAR-T. Il sistema di espressione ricombinante stabile supporta saggi di legame quantitativi, valutazioni di citotossicità ADCC/CDC, studi sull’internalizzazione dei recettori e screening ad alta produttività degli anticorpi mediante citometria a flusso. Il background CHO garantisce una bassa espressione endogena della maggior parte degli antigeni di superficie umani, assicurando che i segnali osservati siano attribuibili al transgene Nectin-4 espresso in modo stabile. Questa linea cellulare è convalidata per l’uso nei flussi di lavoro di scoperta di farmaci, nella selezione di candidati preclinici e negli studi meccanicistici sulla biologia del recettore Nectin-4.

Per colture aderenti: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)

Per colture in sospensione: CHO Growth Medium A (da InSCREENeX; numero di catalogo InSCREENeX INS-ME-1039)

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

Dopo lo scongelamento, dividere le cellule in un rapporto da 1:2 a 1:3 in fiasche T25 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano (per le colture aderenti) per almeno 24 ore.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia