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Cellules hépatiques Chang (HeLa)
Tissu
Foie
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

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Cellules hépatiques Chang (HeLa)

Cell line · Référence du produit 300139

La lignée cellulaire hépatique Chang, que l'on croyait à l'origine issue d'un tissu hépatique humain normal, a fait l'objet d'une reclassification importante à la suite de recherches approfondies...

€550.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire Chang-liver, dont on pensait à l'origine qu'elle était dérivée de tissus hépatiques humains normaux, a fait l'objet d'une reclassification importante à la suite d'un profilage génétique avancé. Les techniques de profilage de l'ADN par PCR STR ont démontré que la lignée cellulaire Chang Liver ne se distingue pas de la lignée cellulaire HeLa, ce qui suggère qu'elle n'est pas dérivée de cellules hépatocytaires comme on le pensait auparavant, mais qu'elle devrait plutôt être considérée comme un dérivé de HeLa. Cette révélation a d'importantes implications pour les chercheurs qui utilisent cette lignée cellulaire, soulignant la nécessité d'interpréter avec prudence les résultats expérimentaux dérivés de son utilisation.

Les cellules HeLa, prélevées à l'origine sur Henrietta Lacks, une femme noire, au début des années 1950, sont connues pour leur croissance robuste et leur stabilité génétique in vitro, des caractéristiques probablement partagées par la lignée cellulaire Chang Liver compte tenu de sa similarité génétique. Dans ce contexte, les études utilisant la lignée cellulaire Chang Cells dans la recherche sur la fonction ou les maladies du foie devront peut-être être réévaluées ou confirmées par d'autres modèles spécifiques d'hépatocytes. Cette erreur d'identification met également en lumière des problèmes plus généraux liés aux pratiques de culture cellulaire, notamment la contamination croisée et les erreurs d'étiquetage, soulignant l'importance d'une authentification régulière des lignées cellulaires utilisées dans le cadre de la recherche.

Tissu
Foie
Maladie
Adénocarcinome
Synonymes
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, chez les hamsters syriens

04Identifiants

Référence
Foie de Chang (HeLa) (numéro de catalogue 300139 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Expression et sensibilité

Isoenzymes
G6PD, A
Virus
Test MHV (virus de l'hépatite de la souris) négatif
Sensibilité aux virus
Poliovirus 1, 2, 3, adénovirus 3, stomatite vésiculaire (Indiana)
Transcriptase inverse
Négatif
Produits
Kératine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 donnera une couche confluente en environ 4 jours.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
30 ans