Mine otse sisu juurde
Chang maksa (HeLa) rakud
Kude
Maksa
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Dokumendid

Chang maksa (HeLa) rakud

Cell line · Toote number 300139

Chang’i maksarakuliin, mida algselt peeti pärinevaks normaalsest inimese maksakudest, on läbinud olulise ümberklassifitseerimise pärast põhjalikke...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Changi maksarakkude liin, mida algselt peeti normaalsest inimmaksakust pärinevaks, on pärast täiustatud geneetilist profileerimist oluliselt ümber klassifitseeritud. STR PCR DNA-profiili määramise meetodid on näidanud, et Chang Liver'i rakuliini ei saa eristada HeLa rakuliinist, mis näitab, et see ei ole saadud hepatotsüütide rakkudest, nagu varem arvati, vaid seda tuleks pidada pigem HeLa derivaadiks. Sellel avastusel on oluline mõju seda rakuliini kasutavatele teadlastele, rõhutades vajadust selle kasutamisel saadud katsetulemuste hoolika tõlgendamise järele.

HeLa rakud, mis algselt võeti 1950ndate alguses Henrietta Lacksilt, mustanahalisest naisest, on tuntud oma tugeva kasvu ja geneetilise stabiilsuse poolest in vitro, mis on tõenäoliselt ühised Changi maksa rakuliiniga, arvestades selle geneetilist sarnasust. See taust tingib vajaduse, et Chang Liver'i rakuliini kasutamist maksafunktsiooni või -haigustega seotud uuringutes tuleb ümber hinnata või kinnitada täiendavate hepatotsüütide-spetsiifiliste mudelite abil. Vale identifitseerimine toob esile ka laiemaid probleeme rakukultuuride kasvatamisel, sealhulgas ristsaastumist ja valesti märgistamist, rõhutades teadusuuringutes kasutatavate rakuliinide regulaarse autentimise tähtsust.

Kude
Maksa
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, Süüria hamstritel

04Tunnused

Viide
Chang maksa (HeLa) (Cytioni katalooginumber 300139)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
G6PD, A
Viirused
Testitud MHV (hiirte hepatiidi viirus) negatiivne
Viirusele vastuvõtlikkus
Polioviirus 1, 2, 3, adenoviirus 3, vesikulaarstomatiit (Indiana)
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Keratiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
30 aastat