Chang maksa (HeLa) rakud
Cell line · Toote number 300139
Chang’i maksarakuliin, mida algselt peeti pärinevaks normaalsest inimese maksakudest, on läbinud olulise ümberklassifitseerimise pärast põhjalikke...
Kohandamine / Soovitused
- Chang maksa (HeLa) rakudCell line€550.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
Changi maksarakkude liin, mida algselt peeti normaalsest inimmaksakust pärinevaks, on pärast täiustatud geneetilist profileerimist oluliselt ümber klassifitseeritud. STR PCR DNA-profiili määramise meetodid on näidanud, et Chang Liver'i rakuliini ei saa eristada HeLa rakuliinist, mis näitab, et see ei ole saadud hepatotsüütide rakkudest, nagu varem arvati, vaid seda tuleks pidada pigem HeLa derivaadiks. Sellel avastusel on oluline mõju seda rakuliini kasutavatele teadlastele, rõhutades vajadust selle kasutamisel saadud katsetulemuste hoolika tõlgendamise järele.
HeLa rakud, mis algselt võeti 1950ndate alguses Henrietta Lacksilt, mustanahalisest naisest, on tuntud oma tugeva kasvu ja geneetilise stabiilsuse poolest in vitro, mis on tõenäoliselt ühised Changi maksa rakuliiniga, arvestades selle geneetilist sarnasust. See taust tingib vajaduse, et Chang Liver'i rakuliini kasutamist maksafunktsiooni või -haigustega seotud uuringutes tuleb ümber hinnata või kinnitada täiendavate hepatotsüütide-spetsiifiliste mudelite abil. Vale identifitseerimine toob esile ka laiemaid probleeme rakukultuuride kasvatamisel, sealhulgas ristsaastumist ja valesti märgistamist, rõhutades teadusuuringutes kasutatavate rakuliinide regulaarse autentimise tähtsust.
- Kude
- Maksa
- Haigus
- Adenokartsinoom
- Sünonüümid
- Chang-liver
- Chang Cells
- Chang
- CHL
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Tuumorigeenne
- Jah, Süüria hamstritel
04Tunnused
- Viide
- Chang maksa (HeLa) (Cytioni katalooginumber 300139)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0238
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Isoensüümid
- G6PD, A
- Viirused
- Testitud MHV (hiirte hepatiidi viirus) negatiivne
- Viirusele vastuvõtlikkus
- Polioviirus 1, 2, 3, adenoviirus 3, vesikulaarstomatiit (Indiana)
- Pöördtranskriptaas
- Negatiivne
- Tooted
- Keratiin
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Taastumine pärast sulamist
- Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 30 aastat
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
 confluent.jpg)