Preskoči na vsebino
Celice Changovih jeter (HeLa)
Tkivo
Jetra
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Dokumenti

Celice Changovih jeter (HeLa)

Cell line · Številka izdelka 300139

Celična linija Chang Liver, za katero se je prvotno menilo, da izhaja iz normalnega človeškega jetrnega tkiva, je bila po naprednih...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija Chang Liver, za katero se je prvotno domnevalo, da izhaja iz normalnega človeškega jetrnega tkiva, je bila po naprednem genetskem profiliranju bistveno prerazvrščena. Tehnike profiliranja DNK s STR PCR so pokazale, da se celična linija Chang Liver ne razlikuje od celične linije HeLa, kar kaže, da ne izhaja iz celic hepatocitov, kot je veljalo prej, temveč jo je treba obravnavati kot derivat HeLa. To razkritje ima pomembne posledice za raziskovalce, ki uporabljajo to celično linijo, saj poudarja potrebo po skrbni razlagi eksperimentalnih rezultatov, pridobljenih z njeno uporabo.

Celice HeLa, ki so bile v začetku petdesetih let prejšnjega stoletja odvzete temnopolti ženski Henrietti Lacks, so znane po močni rasti in genetski stabilnosti in vitro, kar so lastnosti, ki jih ima verjetno tudi celična linija Chang Liver glede na njeno genetsko podobnost. Zaradi tega je treba študije, ki uporabljajo celično linijo Chang Liver v raziskavah, povezanih z delovanjem ali boleznimi jeter, ponovno oceniti ali potrditi z dodatnimi modeli, specifičnimi za hepatocite. Napačna identifikacija opozarja tudi na širša vprašanja v praksah celičnih kultur, vključno z navzkrižno kontaminacijo in napačnim označevanjem, kar poudarja pomen rednega preverjanja pristnosti celičnih linij, ki se uporabljajo v raziskovalnih okoljih.

Tkivo
Jetra
Bolezen
Adenokarcinom
Sinonimi
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, pri sirskih hrčkih

04Identifikatorji

Navajanje vira
Changova jetra (HeLa) (kataloška številka Cytion 300139)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Izražanje in dovzetnost

Izoenzimi
G6PD, A
Virusi
Preizkus MHV (virus mišjega hepatitisa) negativen
Občutljivost na virus
Poliovirus 1, 2, 3, adenovirus 3, vezikularni stomatitis (Indiana)
Reversna transkriptaza
Negativni
Izdelki
Keratin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh oblikovalo konfluentno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
30 let