Siirry sisältöön
Changin maksasolut (HeLa)
Kudos
Maksa
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Asiakirjat

Changin maksasolut (HeLa)

Cell line · Tuotenumero 300139

Chang-maksasolulinja, jonka alun perin uskottiin olevan peräisin normaalista ihmisen maksakudoksesta, on käynyt läpi merkittävän uudelleenluokittelun edistyneiden...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Changin maksasolulinja, jonka alun perin uskottiin olevan peräisin normaalista ihmisen maksakudoksesta, on luokiteltu uudelleen kehittyneen geneettisen profiloinnin jälkeen. STR-PCR-DNA-profilointitekniikat ovat osoittaneet, että Chang Liver -solulinja ei eroa HeLa-solulinjasta, mikä viittaa siihen, että sitä ei ole johdettu hepatosyyttisoluista, kuten aiemmin luultiin, vaan sitä olisi pikemminkin pidettävä HeLa-solujohdannaisena. Tällä paljastuksella on merkittäviä vaikutuksia tätä solulinjaa käyttäville tutkijoille, ja se korostaa tarvetta tulkita huolellisesti sen käytöstä saatuja kokeellisia tuloksia.

HeLa-solut, jotka on alun perin otettu mustaihoiselta Henrietta Lacksilta 1950-luvun alussa, tunnetaan vahvasta kasvustaan ja geneettisestä stabiilisuudestaan in vitro, ja nämä ominaisuudet ovat todennäköisesti yhteisiä Changin maksasolulinjan kanssa, kun otetaan huomioon sen geneettinen samankaltaisuus. Tämä tausta edellyttää, että tutkimukset, joissa Chang Liver -solulinjaa käytetään maksan toimintaan tai sairauksiin liittyvässä tutkimuksessa, on ehkä arvioitava uudelleen tai vahvistettava muilla hepatosyytti-spesifisillä malleilla. Virheellinen tunnistaminen tuo esiin myös laajempia soluviljelykäytäntöihin liittyviä kysymyksiä, kuten ristikontaminaatiota ja väärää merkintää, mikä korostaa tutkimusympäristöissä käytettävien solulinjojen säännöllisen todentamisen tärkeyttä.

Kudos
Maksa
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, syyrialaisilla hamstereilla

04Tunnisteet

Lähdeviite
Changin maksa (HeLa) (Cytionin luettelonumero 300139)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
G6PD, A
Virukset
Testattu MHV (hiiren hepatiittivirus) negatiivinen
Viruksille altistuminen
Poliovirus 1, 2, 3, adenovirus 3, vesicular stomatitis (Indiana)
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
Keratiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen kerroksen noin 4 päivässä.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
30 vuotta