Čanga aknu (HeLa) šūnas
Cell line · Preces numurs 300139
Chang aknu šūnu līnija, par kuru sākotnēji tika uzskatīts, ka tā ir iegūta no normāla cilvēka aknu auda, ir piedzīvojusi būtisku pārklasificēšanu pēc padziļinātiem...
Pielāgošana / Ieteikumi
- Čanga aknu (HeLa) šūnasCell line€550.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
Čanga aknu šūnu līnija, par kuru sākotnēji tika uzskatīts, ka tā iegūta no normāliem cilvēka aknu audiem, ir būtiski pārklasificēta pēc uzlabotas ģenētiskās profilēšanas. STR PCR DNS profilēšanas metodes ir pierādījušas, ka Chang aknu šūnu līnija neatšķiras no HeLa šūnu līnijas, kas liecina, ka tā nav iegūta no hepatocītu šūnām, kā uzskatīts iepriekš, bet drīzāk uzskatāma par HeLa atvasinājumu. Šim atklājumam ir svarīga ietekme uz pētniekiem, kas izmanto šo šūnu līniju, uzsverot nepieciešamību rūpīgi interpretēt eksperimentālos rezultātus, kas iegūti, izmantojot šo šūnu līniju.
HeLa šūnas, kas sākotnēji 1950. gadu sākumā tika iegūtas no melnādainās sievietes Henriettas Lacks, ir pazīstamas ar savu spēcīgo augšanu un ģenētisko stabilitāti in vitro, un šīs īpašības, visticamāk, piemīt arī Čanga aknu šūnu līnijai, ņemot vērā tās ģenētisko līdzību. Šī iemesla dēļ pētījumi, kuros izmanto Chang aknu šūnu līniju ar aknu darbību vai slimībām saistītos pētījumos, iespējams, būs jāpārvērtē vai jāapstiprina, izmantojot papildu hepatocītiem specifiskus modeļus. Kļūdainā identifikācija arī norāda uz plašākām problēmām šūnu kultūru praksē, tostarp krustenisko kontamināciju un nepareizu marķēšanu, uzsverot, cik svarīgi ir regulāri pārbaudīt pētniecībā izmantoto šūnu līniju autentiskumu.
- Audums
- Aknas
- Slimība
- Adenokarcinoma
- Sinonīmi
- Chang-liver
- Chang Cells
- Chang
- CHL
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Tumorogēns
- Jā, Sīrijas kāmjiem
04Identifikatori
- Atsauce
- Čanga aknas (HeLa) (Cytion kataloga numurs 300139)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0238
05Pazīmes un uzņēmība
- Izoenzīmi
- G6PD, A
- Vīrusi
- MHV (peļu hepatīta vīrusa) tests negatīvs
- Jutība pret vīrusiem
- Poliovīruss 1, 2, 3, adenovīruss 3, vezikulārais stomatīts (Indiana)
- Reversā transkriptāze
- Negatīvs
- Produkti
- Keratīns
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Sēšanas blīvums
- 1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atgūšanās pēc atkusņa
- Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 30 gadi
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
 confluent.jpg)