Pāriet uz saturu
Čanga aknu (HeLa) šūnas
Audums
Aknas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Dokumenti

Čanga aknu (HeLa) šūnas

Cell line · Preces numurs 300139

Chang aknu šūnu līnija, par kuru sākotnēji tika uzskatīts, ka tā ir iegūta no normāla cilvēka aknu auda, ir piedzīvojusi būtisku pārklasificēšanu pēc padziļinātiem...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Čanga aknu šūnu līnija, par kuru sākotnēji tika uzskatīts, ka tā iegūta no normāliem cilvēka aknu audiem, ir būtiski pārklasificēta pēc uzlabotas ģenētiskās profilēšanas. STR PCR DNS profilēšanas metodes ir pierādījušas, ka Chang aknu šūnu līnija neatšķiras no HeLa šūnu līnijas, kas liecina, ka tā nav iegūta no hepatocītu šūnām, kā uzskatīts iepriekš, bet drīzāk uzskatāma par HeLa atvasinājumu. Šim atklājumam ir svarīga ietekme uz pētniekiem, kas izmanto šo šūnu līniju, uzsverot nepieciešamību rūpīgi interpretēt eksperimentālos rezultātus, kas iegūti, izmantojot šo šūnu līniju.

HeLa šūnas, kas sākotnēji 1950. gadu sākumā tika iegūtas no melnādainās sievietes Henriettas Lacks, ir pazīstamas ar savu spēcīgo augšanu un ģenētisko stabilitāti in vitro, un šīs īpašības, visticamāk, piemīt arī Čanga aknu šūnu līnijai, ņemot vērā tās ģenētisko līdzību. Šī iemesla dēļ pētījumi, kuros izmanto Chang aknu šūnu līniju ar aknu darbību vai slimībām saistītos pētījumos, iespējams, būs jāpārvērtē vai jāapstiprina, izmantojot papildu hepatocītiem specifiskus modeļus. Kļūdainā identifikācija arī norāda uz plašākām problēmām šūnu kultūru praksē, tostarp krustenisko kontamināciju un nepareizu marķēšanu, uzsverot, cik svarīgi ir regulāri pārbaudīt pētniecībā izmantoto šūnu līniju autentiskumu.

Audums
Aknas
Slimība
Adenokarcinoma
Sinonīmi
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, Sīrijas kāmjiem

04Identifikatori

Atsauce
Čanga aknas (HeLa) (Cytion kataloga numurs 300139)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
G6PD, A
Vīrusi
MHV (peļu hepatīta vīrusa) tests negatīvs
Jutība pret vīrusiem
Poliovīruss 1, 2, 3, adenovīruss 3, vezikulārais stomatīts (Indiana)
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Keratīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
30 gadi