Prejsť na obsah
Changove pečeňové bunky (HeLa)
Tkanivo
Pečeň
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL

Dokumenty

Changove pečeňové bunky (HeLa)

Cell line · Číslo výrobku 300139

Bunka Chang, o ktorej sa pôvodne predpokladalo, že pochádza z normálneho ľudského pečeňového tkaniva, prešla významnou reklasifikáciou v dôsledku pokročilých...

€550.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia Chang Liver, o ktorej sa pôvodne predpokladalo, že pochádza z normálneho ľudského pečeňového tkaniva, prešla po pokročilom genetickom profilovaní významnou reklasifikáciou. Techniky profilovania DNA pomocou STR PCR preukázali, že bunkovú líniu Chang Liver nemožno rozlíšiť od bunkovej línie HeLa, čo naznačuje, že nie je odvodená z hepatocytových buniek, ako sa predtým predpokladalo, ale mala by sa skôr považovať za derivát HeLa. Toto zistenie má dôležité dôsledky pre výskumníkov, ktorí používajú túto bunkovú líniu, a zdôrazňuje potrebu starostlivej interpretácie experimentálnych výsledkov získaných z jej použitia.

Bunky HeLa, pôvodne odobraté černoške Henriette Lacksovej začiatkom 50. rokov 20. storočia, sú známe svojím robustným rastom a genetickou stabilitou in vitro, čo sú vlastnosti, ktoré má pravdepodobne aj bunková línia Chang Liver vzhľadom na jej genetickú podobnosť. Toto pozadie si vyžaduje, aby sa štúdie využívajúce bunkovú líniu Chang Liver vo výskume týkajúcom sa funkcie alebo ochorení pečene možno museli prehodnotiť alebo potvrdiť pomocou ďalších modelov špecifických pre hepatocyty. Nesprávna identifikácia tiež poukazuje na širšie problémy v praxi bunkových kultúr vrátane krížovej kontaminácie a nesprávneho označovania, čo zdôrazňuje dôležitosť pravidelného overovania pravosti bunkových línií používaných vo výskumných zariadeniach.

Tkanivo
Pečeň
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
  • Chang-liver
  • Chang Cells
  • Chang
  • CHL

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, u sýrskych škrečkov

04Identifikátory

Citácia
Changova pečeň (HeLa) (katalógové číslo Cytion 300139)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0238

05Prejav a náchylnosť

Izoenzýmy
G6PD, A
Vírusy
Testovaný MHV (vírus myšej hepatitídy) negatívny
Náchylnosť na vírusy
Poliovírus 1, 2, 3, adenovírus 3, vezikulárna stomatitída (Indiana)
Reverzná transkriptáza
Negatívne
Produkty
Keratín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2 vytvorí konfluentnú vrstvu za približne 4 dni.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
30 rokov