 confluent.jpg)
- Audinys
- Kepenys
- Liga
- Adenokarcinoma
- Sinonimai
- Chang-liver, Chang Cells, Chang, CHL
Dokumentai
Chang kepenų (HeLa) ląstelės
Cell line · Prekės numeris 300139
„Chang“ kepenų ląstelių linija, kuri iš pradžių buvo laikoma kilusia iš normalaus žmogaus kepenų audinio, po išsamių tyrimų buvo iš esmės perklasifikuota...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- Chang kepenų (HeLa) ląstelėsCell line€550.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
Chang kepenų ląstelių linija, iš pradžių laikyta kilusia iš normalaus žmogaus kepenų audinio, buvo iš esmės perklasifikuota atlikus pažangų genetinį profiliavimą. STR PGR DNR DNR profiliavimo metodai parodė, kad Chang Liver ląstelių linija nesiskiria nuo HeLa ląstelių linijos, o tai rodo, kad ji nėra gauta iš hepatocitų ląstelių, kaip manyta anksčiau, o veikiau turėtų būti laikoma HeLa dariniu. Šis atradimas turi svarbią reikšmę mokslininkams, naudojantiems šią ląstelių liniją, ir pabrėžia būtinybę atidžiai interpretuoti eksperimentinius rezultatus, gautus ją naudojant.
HeLa ląstelės, iš pradžių paimtos iš juodaodės Henriettos Lacks 1950 m. pradžioje, yra žinomos dėl savo stipraus augimo ir genetinio stabilumo in vitro, t. y. savybių, kuriomis greičiausiai pasižymi ir Chang kepenų ląstelių linija, atsižvelgiant į jos genetinį panašumą. Dėl šių aplinkybių tyrimus, kuriuose naudojama Chang kepenų ląstelių linija, atliekant tyrimus, susijusius su kepenų funkcija ar ligomis, gali tekti iš naujo įvertinti arba patvirtinti naudojant papildomus hepatocitams būdingus modelius. Neteisingas identifikavimas taip pat išryškina platesnes ląstelių kultūrų praktikos problemas, įskaitant kryžminę taršą ir neteisingą ženklinimą, pabrėžiant, kaip svarbu reguliariai tikrinti tyrimuose naudojamų ląstelių linijų autentiškumą.
- Audinys
- Kepenys
- Liga
- Adenokarcinoma
- Sinonimai
- Chang-liver
- Chang Cells
- Chang
- CHL
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Moteris
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Morfologija
- Į epitelį panašus
- Tumorogeninis
- Taip, Sirijos žiurkėnams
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- Chang kepenys (HeLa) (Cytion katalogo numeris 300139)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0238
05Išraiška ir jautrumas
- Izofermentai
- G6PD, A
- Virusai
- MHV (pelių hepatito virusas) neigiamas
- Jautrumas virusams
- Poliovirusas 1, 2, 3, adenovirusas 3, vezikulinis stomatitas (Indiana)
- Atvirkštinė transkriptazė
- Neigiamas
- Produktai
- Keratinas
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 1 x 104 ląstelės/cm2 per maždaug 4 dienas sudarys konfluentinį sluoksnį.
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atkūrimas po atšilimo
- Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 30 metų
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip