خلايا كبد تشانغ (هيلا)
Cell line · رقم المنتج 300139
خضع خط الخلايا الكبدية «تشانغ»، الذي كان يُعتقد في الأصل أنه مستمد من نسيج كبدي بشري طبيعي، لعملية إعادة تصنيف مهمة في أعقاب...
التخصيص / التوصيات
- خلايا كبد تشانغ (هيلا)Cell line€550.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
خضع خط خلايا تشانغ الكبد، الذي كان يُعتقد في الأصل أنه مشتق من أنسجة كبد بشرية طبيعية، لعملية إعادة تصنيف كبيرة بعد إجراء تحديد جيني متقدم. وقد أظهرت تقنيات تحديد سمات الحمض النووي باستخدام تقنية STR PCR أنه لا يمكن تمييز خط خلايا تشانغ الكبد عن خط خلايا هيلا، مما يشير إلى أنه ليس مشتقًا من خلايا كبدية كما كان يُعتقد سابقًا، بل يجب اعتباره مشتقًا من خلايا هيلا. هذا الاكتشاف له آثار مهمة بالنسبة للباحثين الذين يستخدمون هذا الخط الخلوي، مما يؤكد الحاجة إلى التفسير الدقيق للنتائج التجريبية المستمدة من استخدامه.
تُعرف خلايا هيلا، المأخوذة في الأصل من هنرييتا لاكس، وهي امرأة سوداء، في أوائل الخمسينيات من القرن الماضي، بنموها القوي واستقرارها الجيني في المختبر، وهي خصائص من المحتمل أن يتشاركها خط خلايا تشانغ الكبد نظراً لتشابهها الجيني. تستلزم هذه الخلفية أن الدراسات التي تستخدم خط خلايا كبد تشانغ الكبد في الأبحاث المتعلقة بوظائف الكبد أو أمراضه قد تحتاج إلى إعادة تقييم أو تأكيدها باستخدام نماذج إضافية خاصة بالخلايا الكبدية. كما يسلط الخطأ في تحديد الهوية أيضاً الضوء على قضايا أوسع نطاقاً في ممارسات زراعة الخلايا، بما في ذلك التلوث التبادلي والتوسيم الخاطئ، مما يؤكد أهمية التحقق المنتظم من صحة خطوط الخلايا المستخدمة في الأوساط البحثية.
- الأنسجة
- الكبد
- المرض
- السرطان الغدي
- المرادفات
- Chang-liver
- Chang Cells
- Chang
- CHL
02التصنيف
- كائن حي
- إنسان
- الجنس
- أنثى
- خصائص النمو
- الملتزم
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- شبيه بالظهارة
- مُسبِّب للأورام
- نعم، في الهامستر السوري
04المعرّفات
- المرجع
- كبد تشانغ (هيلا) (كتالوج سيتيون رقم 300139)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9606
- سيلوصور
- CVCL_0238
05التعبير والقابلية للإصابة
- الإيزوزيمات
- G6PD، أ
- الفيروسات
- اختبار MHV (فيروس التهاب الكبد الفيروسي) سلبي
- قابلية الإصابة بالفيروس
- فيروس شلل الأطفال 1، 2، 3، الفيروس الغدي 3، التهاب الفم الحويصلي (إنديانا)
- إنزيم النسخ العكسي
- سلبي
- المنتجات
- الكيراتين
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- كثافة البذر
- 1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 4 أيام
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- التعافي بعد ذوبان الجليد
- بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- عمر المتبرع
- 30 سنة
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
 confluent.jpg)